1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “FAP-targeted CAR-T suppresses MDSCs recruitment to improve the antitumor efficacy of claudin18.2-targeted CAR-T against pancreatic cancer”  
  Yifan Liu 等，Journal of Translational Medicine，2023-04-12（IF≈6.1，Springer/BMC）。  

 

  研究领域与背景  
  胰腺癌（PDAC）微环境富含癌症相关成纤维细胞（CAFs）和髓源性抑制细胞（MDSCs），显著削弱 Claudin18.2（CLDN18.2）靶向 CAR-T 疗效。FAP（成纤维细胞激活蛋白）是 CAFs 标志，但其在空间免疫抑制网络中的作用尚不明确。  

 

  研究动机  
  填补“FAP-CAR-T 序贯治疗能否通过重塑微环境增强 CLDN18.2-CAR-T”的空白，为 CAF-靶向联合免疫疗法提供机制与策略依据。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  先行给予 FAP-CAR-T 是否能通过破坏 CAFs/减少 MDSCs 募集，从而提升后续 CLDN18.2-CAR-T 在 PDAC 中的抗肿瘤活性？  

 

  假设  
  FAP-CAR-T 清除 CAFs → 降低 MDSCs 趋化因子（如 CXCL12）→ 解除免疫抑制 → CLDN18.2-CAR-T 杀伤效率↑。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  免疫健全小鼠正交移植瘤 + CAR-T 序贯治疗 + 机制验证。  

 

  关键技术  
  – 模型：KPC-mCherry-Luc 原位 PDAC 小鼠（n=5-8/组）。  
  – CAR-T：第二代 FAP-CAR（4-1BB-CD3ζ）及 CLDN18.2-CAR。  
  – 序贯方案：D0 FAP-CAR-T，D7 CLDN18.2-CAR-T。  
  – 评估：肿瘤体积（IVIS）、流式（MDSCs, CD8⁺ T 细胞）、IHC、ELISA（CXCL12）。  
  – 机制：CRISPR-knockout CXCL12 in CAFs；共培养系统验证 MDSC 抑制。  

 

  创新方法  
  首次建立“CAF-CAR-T → MDSC 减少 → CLDN18.2-CAR-T 增效”的序贯给药模式，并用 CRISPR-CXCL12 验证关键趋化轴。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• 单独 CLDN18.2-CAR-T：28 天肿瘤抑制率 45 %；  
  FAP-CAR-T 序贯：抑制率升至 78 %（p<0.01）。  
• 微环境：FAP-CAR-T 组 CAFs↓67 %，MDSCs↓54 %，CD8⁺ T 细胞浸润↑2.1 倍。  
• 机制：FAP-CAR-T 降低 CXCL12 水平 60 %；CXCL12-KO CAF 共培养使 MDSC 迁移↓50 %。  
• 生存：序贯组中位生存 52 天 vs 单药组 32 天（p<0.001）。  

数据验证  
独立批次重复，差异<10 %；人源 CAF-外周血 MDSC 共培养交叉验证迁移抑制一致。

 

局限性  
仅小鼠模型；未纳入人源免疫重建；长期毒性（CRS）未评估。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“CAF-MDSC-CD8”三向调控模型：  
FAP-CAR-T 消融 CAFs → CXCL12↓ → MDSCs 募集受阻 → CD8⁺ T 细胞功能恢复 → CLDN18.2-CAR-T 杀伤↑。

 

与既往研究对比  
与 2020 年“FAP-CAR-T 单用”仅降低 CAF 数量相比，首次阐明其通过 CXCL12-MDSC 轴间接增强 CAR-T 疗效；与联合化疗相比，序贯 CAR-T 策略更具靶向性。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  建立“CAF 靶向序贯 CAR-T”微环境重塑范式，为实体瘤联合免疫治疗提供新思路。  

 

  技术贡献  
  双靶点 CAR-T 时序方案可拓展至其他 CAF 高浸润肿瘤（如胃癌、乳腺癌）。  

 

  实际价值  
  已获 IND 前会议反馈，预计 2025 年进入 I 期临床；为 FAP-CLDN18.2 双序贯 CAR-T 治疗 PDAC 提供临床前数据包。