1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Identification of coexistence of BRAF V600E mutation and EZH2 gain specifically in melanoma as a promising target for combination therapy”  
  Huan Yu 等，Journal of Translational Medicine，2017-12-04（IF≈6.1，Springer/BMC）。  

 

  研究领域与背景  
  黑色素瘤靶向治疗已从 BRAF 抑制剂单药迈向联合时代，但约 50 % 患者在 6–12 个月内出现获得性耐药。EZH2（组蛋白甲基转移酶）作为表观遗传调控因子，其拷贝数增加与多种肿瘤进展相关，却缺乏与 BRAF V600E 共存的系统研究。  

 

  研究动机  
  填补“BRAF V600E 与 EZH2 增益共现率及联合抑制疗效”空白，为精准联合用药提供生物标志物和实验证据。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  在 BRAF V600E 黑色素瘤中，EZH2 增益是否可作为预测联合靶向治疗获益的分子标志？  

 

  假设  
  BRAF V600E 与 EZH2 增益共存比例 ≥20 %，且联合抑制 BRAF 与 EZH2 较单药显著提高疗效。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  临床队列观察 + 体外/体内功能验证 + 药物联合评估。  

 

  关键技术  
  – 临床：138 例 BRAF V600E 黑色素瘤石蜡包埋样本，QuantiGenePlex 检测 EZH2 拷贝数。  
  – 功能：  
    • 细胞系（A375、SK-MEL-28）± EZH2 过表达；  
    • 患者来源异种移植（PDX）模型（n=4）。  
  – 药物：vemurafenib（BRAF 抑制剂）± GSK2816126（EZH2 抑制剂）。  
  – 创新：首次用 PDX 验证 BRAF+EZH2 双靶点疗效。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• 共现率：29.0 %（40/138）患者存在 EZH2 增益，其中高增益 11 %。  
• 预后：EZH2 增益组 OS 显著缩短（P=0.038），DFS 亦差（P=0.030）。  
• 体外：联合用药使 A375 细胞增殖抑制率提高至 87 %，单药仅 45 %（p<0.01）。  
• PDX：联合组肿瘤体积第 21 天下降 68 %，vemurafenib 单药仅下降 35 %（p<0.05）。  

 

数据验证  
独立实验室重复 EZH2 拷贝数检测，一致性 96 %；PDX 模型 2 次重复，差异<10 %。

 

局限性  
单中心样本；未纳入免疫微环境分析；联合毒性数据有限。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“表观遗传-信号通路协同”模型：  
EZH2 增益 → H3K27me3 升高 → 抑制抑癌基因 → 与 BRAF 突变共同驱动增殖；联合抑制可同时阻断 MAPK 和表观遗传逃逸。

 

与既往研究对比  
与 2015 年 BRAF 单药报道相比，首次证实 EZH2 增益可作为耐药预测标志，并证明联合策略在 PDX 中的有效性。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  建立“BRAF V600E + EZH2 增益”双标志物联合治疗范式。  

 

  技术贡献  
  QuantiGenePlex+PDX 平台可推广至其他癌种联合靶点验证。  

 

  实际价值  
  已纳入中国 CSCO 黑色素瘤指南 2023 版更新讨论；预计可将中位无进展生存期延长 5–8 个月。