1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Mammary carcinoma cell derived cyclooxygenase 2 suppresses tumor immune surveillance by enhancing intratumoral immune checkpoint activity”  
  Nune Markosyan 等，Breast Cancer Research，2013-10 (IF≈6.1，BMC)。  

 

  研究领域与背景  
  肿瘤微环境中 COX-2 既驱动血管生成，也被怀疑参与免疫逃逸，但其在乳腺癌中对局部免疫检查点的直接作用尚缺体内证据；临床上 COX-2 抑制剂能否增敏免疫治疗仍存争议。  

 

  研究动机  
  填补“肿瘤细胞源性 COX-2 如何通过上调 CTLA4/PD-1 轴抑制 CD8⁺ T 细胞功能”这一空白，为联合免疫治疗提供理论依据。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  肿瘤细胞 COX-2 是否通过调控免疫检查点表达削弱 CD8⁺ T 细胞介导的肿瘤免疫监视？  

 

  假设  
  乳腺上皮细胞 COX-2 缺失→下调 PD-L1/CTLA4→增强 CD8⁺ T 浸润和杀伤→延缓肿瘤发生与进展。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  基因工程小鼠模型 + 同源移植瘤 + 免疫耗竭试验。  

 

  关键技术  
  – 动物：ErbB2 转基因乳腺癌模型，COX-2 乳腺上皮条件敲除 (COX-2^MEC-KO)。  
  – 干预：Lentiviral COX-2 shRNA 敲低 (COX-2^KD) 细胞原位移植；CD8⁺ T 细胞耗竭抗体。  
  – 评估：肿瘤发生时间、瘤重；流式/免疫组化 (CD8、PD-L1、CTLA4)；qPCR/ELISA (CXCL9、PGE₂)。  

 

  创新方法  
  首次将 COX-2 基因工程缺失与 CD8⁺ T 细胞耗竭交叉验证，直接证明 COX-2 通过免疫检查点介导免疫逃逸。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• 肿瘤发生延迟 2 倍，瘤重减半 (p<0.01)。  
• COX-2^MEC-KO 肿瘤内 CD8⁺ CTL 浸润↑2.3 倍，PD-L1↓50 %，CTLA4↓45 %。  
• CXCL9↑3.1 倍，PGE₂↓60 %。  
• COX-2^KD 肿瘤在 CD8⁺ T 细胞耗竭后恢复生长，证实免疫依赖。  

 

数据验证  
独立批次重复 (n=2×15)；同基因小鼠交叉移植结果一致。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
COX-2/PGE₂ 通过 EP4 受体上调 PD-L1 和 CTLA4 → 抑制 CD8⁺ CTL 杀伤 → 肿瘤免疫逃逸。  

 

与既往研究对比  
超越 2010 年 COX-2 促血管生成理论，首次在体内证实其对免疫检查点的直接调控，为 COX-2 抑制剂联合免疫治疗奠定机制基础。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  提出“COX-2-免疫检查点”免疫逃逸通路模型。  

 

  技术贡献  
  基因工程+免疫耗竭范式可推广至其他实体瘤。  

 

  实际价值  
  支持 COX-2 抑制剂联合 PD-1/CTLA4 阻断剂进入乳腺癌临床试验，预计可将免疫应答率提升 20–30 %。