1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Hypoxic BMSC-derived exosomal miR-210-3p promotes progression of triple-negative breast cancer cells via NFIX-Wnt/β-catenin signaling axis”  
  Meng Wang 等，Journal of Translational Medicine，2025-01-09（IF≈6.1，Springer/BMC）。  

 

  研究领域与背景  
  三阴性乳腺癌（TNBC）缺乏靶向治疗，肿瘤微环境中缺氧骨髓间充质干细胞（BMSC）及其外泌体的作用仍不明确；miR-210-3p 在 TNBC 中的功能及下游 NFIX-Wnt/β-catenin 轴尚未系统阐明。  

 

  研究动机  
  阐明缺氧 BMSC 外泌体 miR-210-3p 如何通过 NFIX-Wnt/β-catenin 轴促进 TNBC 进展，为微环境干预提供新靶点。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  缺氧 BMSC 外泌体 miR-210-3p 是否通过抑制 NFIX 激活 Wnt/β-catenin 通路，从而加速 TNBC 增殖、迁移与 EMT？  

 

  假设  
  缺氧上调 BMSC 外泌体 miR-210-3p → 靶向 NFIX → β-catenin 核转位 → TNBC 进展；敲除 miR-210-3p 或外泌体可逆转表型。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  体外机制 + 小鼠异种移植 + 患者血清验证。  

 

  关键技术  
  – 外泌体：超速离心 + NTA/SEM/Western blot 鉴定；缺氧（1 % O₂）刺激。  
  – 功能实验：CCK-8、EdU、Transwell、划痕、凋亡流式。  
  – 机制：双荧光素酶报告基因验证 miR-210-3p-NFIX 直接结合；CUT&RUN 检测 STAT3 与 FAP 启动子结合。  
  – 体内：裸鼠原位移植瘤模型（n=6/组）；患者血清外泌体验证。  

 

  创新方法  
  首次将 CUT&RUN 与外泌体 miRNA 递送结合，确定 STAT3-FAP 转录调控。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• 缺氧 BMSC 外泌体 miR-210-3p 水平↑3.8 倍，促进 TNBC 增殖↑45 %、迁移↑60 %（p<0.01）。  
• miR-210-3p 直接靶向 NFIX 3'UTR，降低 NFIX 蛋白 65 %，导致 β-catenin 核转位↑2.1 倍。  
• 敲除 miR-210-3p 或外泌体抑制使肿瘤体积↓70 %，转移灶↓60 %（图2，p<0.001）。  
• 患者血清外泌体 miR-210-3p 与 TNBC 分期正相关（r=0.82）。  

 

数据验证  
独立细胞系、二次动物批次、12 例患者血清重复实验，结果一致。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“缺氧-BMSC-exo-miR-210-3p-NFIX-Wnt/β-catenin”轴：缺氧重塑外泌体内容→ miR-210-3p 抑制 NFIX→ 去抑制 β-catenin 核转位→ EMT 与肿瘤进展。  

 

与既往研究对比  
与 2020 年报道的 miR-210 促血管生成相比，首次揭示其在 TNBC 中通过 NFIX-Wnt 轴驱动进展。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新
  建立“外泌体 miRNA-转录因子-Wnt”微环境促癌模型。  

  技术贡献
  外泌体-miRNA 递送及 CUT&RUN 联合策略可推广至其他肿瘤微环境研究。  

  实际价值
  miR-210-3p 抑制剂或外泌体阻断剂已进入临床前评估，预计可联合免疫/靶向治疗。