Abstract
Abstract in English, French Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and culture are 2 common diagnostic tests for detecting Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) in Johne's disease, but they are not as sensitive as polymerase chain reaction (PCR). However, inhibitors can coextract with the target DNA and cause interference in PCR. Development of an immune capture assay followed by PCR amplification can alleviate this problem. In this study, we were able to induce an immune response in chickens using heat or formalin inactivated Map. The purified immunoglobulin (Ig)Y has a molecular weight of 160 kDa. The titers were at 1:6400 and 1:12 800 at weeks 5 to 6 and 8 to 9, respectively, as determined by the IDEXX modified ELISA kit for Johne's disease. The IgY produced from inactivated bacterial cells had no effect on its ability to recognize live Map cells as illustrated by immunofluorescence assay and immune capture PCR results. L’épreuve ELISA et la culture sont deux méthodes de diagnostique usuelles pour détecter Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis (Map) dans les cas de maladie de Johne, mais elles ne sont pas aussi sensible que la méthode d’amplification en chaîne par la polymérase (PCR). Toutefois, des inhibiteurs peuvent être co-extraits avec l’ADN cible et causer de l’interférence dans l’épreuve PCR. Le développement d’une épreuve d’immuno-capture suivie d’une amplification par PCR permet d’éviter ce problème. Dans cette étude, nous avons été en mesure d’induire une réponse immunitaire chez des poulets en utilisant du Map inactivé par la chaleur ou la formaline. L’immunoglobuline (Ig)Y purifiée a un poids moléculaire de 160 kDa. Aux semaines 5 à 6 et 8 à 9 les titres sériques détectés à l’aide de la trousse ELISA modifié d’IDEXX pour la maladie de Johne étaient, respectivement, de 1:6400 et 1:12800. Les IgY produites suite à l’inoculation des bactéries inactivées étaient en mesure de reconnaître des cellules de Map vivantes tel que démontré par les épreuves d’immunofluorescence et de PCR avec immuno-capture. (Traduit par Docteur Serge Messier)