Abstract
Abstract in English, French Three pairs of specific primers were designed to amplify F2-1, F2-2, and XF2-2 truncated capsid protein genes of porcine circovirus type 2 (PCV-2). Amplified sequences were subcloned to pET-32a(+) vectors and expressed in Rosetta (DE3) Escherichia coli by induction of isopropy-β-D-thiogalactoside (IPTG). All of the fusion proteins had positive reactions to PCV-2 antiserum and His-XF2-2 showed the best reactivity. Proteins were used to immunize BALB/c mice to produce monoclonal antibodies (mAbs), and 7 mAbs were selected. Capsid protein N-terminal parts 55 to 96 amino acid (aa), 97 to 141 aa, and 143 to 211 aa were confirmed as binding regions of the 7 mAbs. Reactivity between His-XF2-2 and the 7 mAbs was detected, FmAb-8 showed the best reactivity. The dominant B-cell epitope was located at 97 to 141 aa. The PEPSCAN indicated that the P122-136 peptide contained the dominant B-cell epitope. Trois paires d’amorces ont été définies pour amplifier les gènes tronqués F2-1, F2-2 et XF2-2 à des parties de la protéine de capside du circovirus porcin de type 2 (PCV-2). Les séquences amplifiées ont été sous-clonées dans le vecteur pET-32a(+) et exprimées en tant que protéines fusionnées à une étiquette histidine dans la souche Rosetta (DE3) d’Escherichia coli. Toutes les protéines de fusion ont été révélée par un antisérunm anti-PCV2 at His-XF2-2 a montré la meilleure réactivité. Les protéines ont été utilisées pour immuniser des souris BALB/c afin de produire des anticorps monoclonaux (mAbs) et sept mAbs ont été sélectionnés. La partie N-terminale de la protéine de capside, acides aminés (aa) 55–96, aa 97–141 et aa 143–211 furent confirmées comme étant les régions de reconnaissance des sept mAbs. Une réactivité entre His-XF2-2 et les sept mAbs a été détectée, l’anticorps FmAb-8 montrant la meilleure réactivité. L’épitope dominant de cellules B a été localisé aux aa 97–141. Nous avons montré par PEPSCAN que le peptide P122–136 contient l’épitope dominant. (Traduit par les auteurs)