Thrombin Generation Capacity of Methylene Blue-Treated Plasma Prepared by the Theraflex MB Plasma System

Methylene blue (MB) / light treatment is a well-known procedure for the inactivation of pathogens in fresh frozen plasma (FFP).

For plasma treated with the Theraflex MB Plasma System no profound influence of MB/ light treatment on the characteristics of thrombin generation was detected. In concordance with data from the literature, coagulation factors V, VIII and XI were decreased due to MB/ light treatment. Decrease was less than 20%. Hintergrund: Die Methylenblau(MB)/Licht-Behandlung ist eine etablierte Methode zur Pathogeninaktivierung von gefrorenem Frischplasma (GFP). Ziel der vorliegenden Studie war die Ermittlung der Thrombinbildungs-Charakteristika und der Qualität von MB-Plasma, das mit dem Theraflex MB Plasma System herstellt wurde. Methoden: Es wurden 18 Einzelspenderpräparate mit MB/Licht behandelt und Proben vor und nach Behandlung genommen. Die Herstellung umfasste die Leukozytendepletion, die Zugabe von MB (als Tablette), die Belichtung sowie die anschlieβende Entfernung von MB und seinen Photoprodukten. Verschiedene Plasmaparameter sowie die Thrombinbildung wurden gemessen. Die Thrombinbildung wurde darüber hinaus auch für Solvent/Detergent-Plasma (n = 8) untersucht. Ergebnisse: MB/Licht-Behandlung führte zu einer signifikanten Abnahme der Faktoren V, VIII und XI um 9–18%. Das Fibrinogen nach Clauss nahm um 7% ab, wohingegen die Antigenkonzentration nicht beeinflusst wurde. Die Abnahme der Fibrinogenaktivität korrelierte mit einer um 12% verlängerten Thrombin- und Reptilasezeit. Die Gesamtmenge des im Thrombinbildungs-Assay nachgewiesenen freien Thrombins, angegeben als “area under the curve” (AUC), war vergleichbar für unbehandeltes (93 ± 18% bezogen auf Normalplasma) und MB/Licht-behandeltes Plasma (95 ± 20%). Auch die Peak-Thrombinkonzentration wurde durch die Behandlung nicht signifikant beeinflusst (94 ± 11% (unbehandelt) versus 96 ± 12% (behandelt). Die Zeit bis zum Erreichen des Peaks (“time to peak” (TTP)) betrug für unbehandeltes GFP 105% verglichen mit Normalplasma, für MB/ Licht-behandeltes Plasma 89%. Schlussfolgerung: Plasma, dass mit dem Theraflex MB Plasma System behandelt wurde, zeigte keinen profunden Einfluss der MB/Lichtbehandlung auf die Charakteristika der Thrombinbildung. In Übereinstimung mit Literaturdaten führte die MB/Licht-Behandlung zu einer Abnahme der Gerinnungsfaktoren V, VIII und XI. Die Abnahme betrug weniger als 20%.

Single donor plasma units (n = 18) were MB/light-treated, with sampling before and after processing. Preparation included leukocyte depletion, addition of MB pill prior to illumination, and depletion of MB and photoproducts by filtration. Different plasma parameters and TG were measured. TG additionally was determined in solvent/detergent plasma (n = 8).

MB/light treatment significantly affected factors V, VIII and XI, which were decreased by 9-18%. While the antigen level was not affected, fibrinogen according to Clauss was decreased by 7%, correlating with a 12% prolongation of TT and RT. The total amount of free thrombin generated, given as 'area under the curve' (AUC), was comparable for untreated (93 +/- 18% of normal plasma) and MB/light-treated plasma (95 +/- 20%). Also peak thrombin concentration was not significantly affected by treatment (94 +/- 11% (untreated) vs. 96 +/- 12% (treated)). The 'time to peak' value (TTP) was 105% of normal plasma for untreated FFP and 89% for MB-treated plasma.