Background
Serum small dense LDL-cholesterol (sdLDL-C) value is suggested to bean important risk factor for atherosclerosis. Since sdLDL-C changes may be related to PCSK9 and SREBP-2 functions, the
Conclusions
We concluded that the serum sdLDL-C value is not related to circulating PCSK9. Furthermore, SREBP-2 regulatory system was able to elevate the cellular cholesterol level after reducing LDL influx. We suggest to investigate the cellular sdLDL fate and lipid synthesis pathways in PCSK9-targeting studies. Uvod: Vrednosti malih gustiti čestica LDL-holesterola (sdLDL-C) predstavljene su kao važan faktor rizika za aterosklerozu. Pošto promene u sdLDL-C mogu biti povezane sa funkcijom PCSK9 i SREBP-2, ciljove studije bio je da se istraže korelacije između sdLDL-C, PCSK9 u cirkulaciji, ekspresije SREBP-2 i nekih lipidnih parametara u serumu i frakciji leukocita zdravih ispitanika. Metode: U studiju je nasumično uključeno 124 ispitanika. Lipidni profili izmereni su rutinskim laboratorijskim metodama. Nivo sdLDL-C u serumu izračunat je heparin precipitacionom tehnikom. Vrednosti ćelijskog LDL-C/proteina i holesterola/proteina merene su posle liziranja ćelija binarnim rastvorom metanola/hloroforma. Nivo PCSK9u cirkulaciji meren je tehnikom ELISA. Nivo ekspresije SREBP-2 određen je tehnikom RT-qPCR. Rezultati: Podaci su pokazali značajne korelacije između nivoa LDL-C, TG i sdLDL-C (r=0,34, p=0,01; r=0,2, p=0,04). Nivo PCSK9 u cirkulaciji korelisao je sa LDL-C (r=0,29, p=0,04), ali ne i sa sdLDL-C (r=-0,08, p=0,57). Takođe, vrednost ćelijskog LDL-C nije bila povezana sa nivoom LDL-C u serumu (r=-0,12, p=0,39). Štaviše, otkrivena je inverzna korelacija između vrednosti ćelijskog LDL-C/proteina i vrednosti odredenog de novo holesterola/proteina (r=-0,5, p=0,001). Slični rezultati su uočeni za vrednost ćelijskog LDL-C/proteina i nivo ekspresije SREBP-2 (r=-0,52, p=0,004). Zaključak: Zaključili smo da vrednost sdLDL-C u serumu nije povezana sa PCSK9 u cirkulaciji. Stavise, regulacioni sistem SREBP-2 bio je sposoban da podigne nivo ćelijskog holesterola posle smanjenja dotoka LDL. Savetujemo da se istraži sudbina ćelijskog sdLDL kao i putanje sinteze lipida u studijama koje će se fokusirati na PCSK9.
Methods
One hundred and twenty-four subjects were randomly included in the study. The lipid profile was measured using routine laboratory methods. The serum sdLDL-C level was calculated by a heparin-related precipitation technique. The cellular LDL-C/protein and cholesterol/protein values were measured after lysing of cells with methanol/chloroform binary solvent. The circulating PCSK9 level was measured using ELISA technique. The SREBP-2 expression level was estimated using theRT-qPCR technique.
Results
Data showed significant correlations between LDL-C, TG and sdLDL-C levels (r=0.34, p=0.001; r=0.2, p=0.04). The circulating PCSK9 level was correlated to LDL-C (r=0.29, p=0.04), but not to sdLDL-C (r=-0.08, p=0.57). Also, cellular LDL-C value was not related to serum LDL-C level (r=-0.12, p=0.39). Furthermore, there was an inverse correlation between cellular LDL-C/protein value and estimated de novo cholesterol/protein value (r= -0.5, p=0.001). Similar results were observed for cellular LDL-C/protein value and SREBP-2 expression level (r= -0.52, p=0.004). Conclusions: We concluded that the serum sdLDL-C value is not related to circulating PCSK9. Furthermore, SREBP-2 regulatory system was able to elevate the cellular cholesterol level after reducing LDL influx. We suggest to investigate the cellular sdLDL fate and lipid synthesis pathways in PCSK9-targeting studies. Uvod: Vrednosti malih gustiti čestica LDL-holesterola (sdLDL-C) predstavljene su kao važan faktor rizika za aterosklerozu. Pošto promene u sdLDL-C mogu biti povezane sa funkcijom PCSK9 i SREBP-2, ciljove studije bio je da se istraže korelacije između sdLDL-C, PCSK9 u cirkulaciji, ekspresije SREBP-2 i nekih lipidnih parametara u serumu i frakciji leukocita zdravih ispitanika. Metode: U studiju je nasumično uključeno 124 ispitanika. Lipidni profili izmereni su rutinskim laboratorijskim metodama. Nivo sdLDL-C u serumu izračunat je heparin precipitacionom tehnikom. Vrednosti ćelijskog LDL-C/proteina i holesterola/proteina merene su posle liziranja ćelija binarnim rastvorom metanola/hloroforma. Nivo PCSK9u cirkulaciji meren je tehnikom ELISA. Nivo ekspresije SREBP-2 određen je tehnikom RT-qPCR. Rezultati: Podaci su pokazali značajne korelacije između nivoa LDL-C, TG i sdLDL-C (r=0,34, p=0,01; r=0,2, p=0,04). Nivo PCSK9 u cirkulaciji korelisao je sa LDL-C (r=0,29, p=0,04), ali ne i sa sdLDL-C (r=-0,08, p=0,57). Takođe, vrednost ćelijskog LDL-C nije bila povezana sa nivoom LDL-C u serumu (r=-0,12, p=0,39). Štaviše, otkrivena je inverzna korelacija između vrednosti ćelijskog LDL-C/proteina i vrednosti odredenog de novo holesterola/proteina (r=-0,5, p=0,001). Slični rezultati su uočeni za vrednost ćelijskog LDL-C/proteina i nivo ekspresije SREBP-2 (r=-0,52, p=0,004). Zaključak: Zaključili smo da vrednost sdLDL-C u serumu nije povezana sa PCSK9 u cirkulaciji. Stavise, regulacioni sistem SREBP-2 bio je sposoban da podigne nivo ćelijskog holesterola posle smanjenja dotoka LDL. Savetujemo da se istraži sudbina ćelijskog sdLDL kao i putanje sinteze lipida u studijama koje će se fokusirati na PCSK9.