1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Long non-coding RNA MIR4435-2HG modulates pancreatic cancer stem cells and chemosensitivity to gemcitabine by targeting the miR-1252-5p/STAT1 axis”  
  Baocheng Xie 等，Journal of Translational Medicine，2025-02-07（IF≈6.1，Springer/BMC）。  

 

  研究领域与背景  
  胰腺癌干细胞（CSC）是吉西他滨耐药和复发的根源；lncRNA 作为 ceRNA 网络核心，调控 CSC 干性及药物敏感性的分子机制仍待深入。现有研究多聚焦蛋白编码基因，缺乏针对 MIR4435-2HG/miR-1252-5p/STAT1 轴的系统证据。  

 

  研究动机  
  阐明 MIR4435-2HG 通过 miR-1252-5p/STAT1 调控胰腺癌 CSC 干性及吉西他滨敏感性的分子机制，为逆转耐药提供可干预的 lncRNA 靶点。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  MIR4435-2HG 是否通过海绵吸附 miR-1252-5p 上调 STAT1，从而增强胰腺癌 CSC 干性并诱发吉西他滨耐药？  

 

  假设  
  MIR4435-2HG↑ → 竞争性结合 miR-1252-5p → STAT1↑ → CSC 干性↑ & 吉西他滨耐药↑；敲低 MIR4435-2HG 或恢复 miR-1252-5p 可逆转耐药。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  体外功能-机制验证 + 体内异种移植瘤 + 药物敏感性测试。  

 

  关键技术  
  – 细胞模型：PANC-1、AsPC-1 及类器官；CSC 球形成实验（CD133⁺CD44⁺）。  
  – 干预：shRNA 敲低 MIR4435-2HG；miR-1252-5p mimic/inhibitor；STAT1 过表达/敲除。  
  – 机制：CUT&RUN 验证 STAT1 结合位点；RNA pull-down 确认 MIR4435-2HG-miR-1252-5p 相互作用；吉西他滨 IC₅₀ 测定。  
  – 体内：裸鼠皮下移植瘤 + 吉西他滨治疗。  

 

  创新方法  
  首次将 CUT&RUN 与类器官-吉西他滨耐药模型联用，系统解析 lncRNA-ceRNA-CSC 轴。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• MIR4435-2HG 在胰腺癌组织和 CSC 中高表达，与不良预后正相关（HR=2.1, p<0.01）。  
• 敲低 MIR4435-2HG：  
  – CSC 球形成能力↓65 %（p<0.001）；  
  – 吉西他滨 IC₅₀ 下降 3.2 倍（p<0.01）。  
• 机制：MIR4435-2HG 直接结合 miR-1252-5p；STAT1 为 miR-1252-5p 靶基因；STAT1 过表达可恢复耐药表型。  
• 体内：MIR4435-2HG-KO 组肿瘤体积↓48 %，吉西他滨敏感性↑（p<0.001）。  

 

数据验证  
独立细胞系、类器官及小鼠移植瘤重复实验一致；TCGA-PAAD 队列中 MIR4435-2HG-miR-1252-5p-STAT1 轴表达与生存相关（r=–0.78）。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“MIR4435-2HG-miR-1252-5p-STAT1”调控轴：  
lncRNA 作为 ceRNA 解除 miRNA 抑制→STAT1 上调→激活 CSC 干性相关基因→吉西他滨耐药。  

 

与既往研究对比  
与 2020 年报道的 lncRNA-HOTAIR 通过 Wnt 调控 CSC 相比，首次揭示 STAT1 在胰腺癌 CSC 中的 ceRNA 层面作用。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  建立“lncRNA-ceRNA-STAT1-CSC-化疗耐药”新机制模型。  

 

  技术贡献  
  CUT&RUN + 类器官-药物联用策略可推广至其他实体瘤 lncRNA 研究。  

 

  实际价值  
  MIR4435-2HG 反义寡核苷酸已进入临床前毒理，预计 2026 年启动 I/II 期临床试验，有望与吉西他滨联合提高胰腺癌疗效。