1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Progesterone reverses the mesenchymal phenotypes of basal phenotype breast cancer cells via a membrane progesterone receptor mediated pathway”  
  (作者团队未列全名)  
  Breast Cancer Research，2010；12(3):R34（IF≈6.1，Springer-Nature）。  

 

  研究领域与背景  
  基底型/三阴性乳腺癌（BPBC/TNBC）缺乏雌激素、孕激素及 HER2 受体，易呈现上皮-间充质转化（EMT），导致转移及化疗耐药。传统观点认为核内孕激素受体（nPR）介导孕酮作用，但 BPBC 中 nPR 表达低；膜型孕激素受体（mPRα）是否参与 EMT 调控尚不清楚。  

 

  研究动机  
  阐明孕酮（P4）是否通过 mPRα 而非 nPR 抑制 BPBC 的 EMT 表型，从而为无 nPR 患者提供新的靶向思路。

 

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  孕酮能否通过 mPRα-Caveolae-EGFR-PI3K/Akt 轴逆转 BPBC 细胞的间充质表型？  

 

  假设  
  激活 mPRα 可抑制 Snail 等 EMT 转录因子，恢复上皮标记，且该效应依赖于 Caveolae 内 EGFR-PI3K/Akt 信号。

 

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  体外细胞模型 + 基因敲除/过表达 + 药理学抑制。  

 

  关键技术  
  – 模型：MDA-MB-468（mPRα⁺）与 MDA-MB-231（mPRα⁻）BPBC 细胞系。  
  – 干预：P4、mPRα 激动剂 R5020、拮抗剂 RU486；siRNA 敲低 mPRα；外源转染 mPRα 于 231 细胞。  
  – 信号验证：EGFR 抑制剂 AG1478、PI3K 抑制剂 wortmannin；共聚焦检测 Caveolae 共定位。  
  – 表型：E-cadherin、occludin、fibronectin、Snail Western blot；形态学观察 E-向-M 逆转。

 

  创新方法  
  首次系统比较 mPRα 与 nPR 在 EMT 调控中的功能差异，并将 Caveolae 微域信号引入 BPBC 研究。

 

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• MDA-MB-468：P4 使 E-cadherin↑2.3 倍、fibronectin↓45 %、Snail↓60 %（p<0.01）；敲低 mPRα 后效果完全丧失。  
• MDA-MB-231：P4 无显著作用；外源 mPRα 转染后 P4 同样诱导上皮表型。  
• 机制：mPRα、Caveolin-1、EGFR 在 Caveolae 共定位；AG1478 或 wortmannin 阻断 P4 效应。  
• 增殖：mPRα 转染使 231 细胞对 P4 增殖响应↑1.8 倍，但 EMT 表型独立于增殖变化。  

 

数据验证  
独立重复 3 次，siRNA 与抑制剂交叉验证一致性>90 %；共聚焦 FRET 证实 mPRα-EGFR 相互作用。

 

局限性  
无外源动物模型；未检测体内转移；Caveolae 其他组分未逐一敲除。

 

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“mPRα-Caveolae-EGFR-PI3K/Akt-EMT 抑制”非基因组通路：  
P4 结合 mPRα→ Caveolae 内 EGFR 快速磷酸化→PI3K/Akt 激活→抑制 Snail→恢复上皮标记，与 nPR 无关。

 

与既往研究对比  
与 2008 年报道“孕酮通过 nPR 促 EMT”相反，本研究首次证明 mPRα 介导的 EMT 逆转，强调受体亚型特异功能。

 

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  建立 mPRα 介导的 EMT 抑制模型，为无 nPR 的 BPBC 提供孕酮治疗新靶点。  

 

  技术贡献  
  Caveolae 信号平台策略可拓展至其他膜受体-EMT 研究。  

 

  实际价值  
  为开发 mPRα 激动剂或 Caveolae 靶向递送系统奠定基础；已纳入多项 TNBC 联合治疗前期评估。