Andrographolide suppresses breast cancer progression by modulating tumor-associated macrophage polarization through the Wnt/β-catenin pathway

1. 文献背景信息  
  标题/作者/期刊/年份  
  “Andrographolide suppresses breast cancer progression by modulating tumor-associated macrophage polarization through the Wnt/β-catenin pathway”  
  Lin Li 等，Phytotherapy Research，2022-12（IF≈6.1，Wiley 药理学旗舰）。  

  研究领域与背景  
  三阴性乳腺癌（TNBC）免疫抑制微环境以 M2 型肿瘤相关巨噬细胞（TAM）为主，促进侵袭和耐药。穿心莲内酯（Andrographolide，ADE）虽具抗肿瘤活性，其对 TAM 极化的作用及机制尚不清楚。  

  研究动机  
  填补“ADE 能否通过重编程 TAM 抑制 TNBC 进展”及“Wnt/β-catenin 通路在其中的核心作用”两大空白，为植物源免疫调节剂提供新证据。

2. 研究问题与假设  
  核心问题  
  ADE 是否可通过阻断 Wnt5a/β-catenin 信号抑制 M2 极化并增强 M1 功能，从而抑制 TNBC 生长与转移？  

  假设  
  ADE 下调 Wnt5a→β-catenin 失活→M2→M1 转化→减少 PDGF-AA/CCL2 分泌→抑制肿瘤血管生成与侵袭。

3. 研究方法学与技术路线  
  实验设计  
  体外细胞模型 + 体内移植瘤 + 机制解析。  

  关键技术  
  – 细胞：RAW264.7、BMDM 极化模型（IL-4/IL-13 诱导 M2），共培养 MDA-MB-231、HCC1806、4T-1。  
  – 体内：小鼠皮下/乳腺原位移植瘤（n=6/组），ADE 灌胃 20 mg/kg。  
  – 机制：RNA-seq 差异通路富集，Western blot（Wnt5a、β-catenin、MMP-9）、ELISA（PDGF-AA、CCL2），双荧光素酶报告验证 Wnt5a 启动子活性。  

  创新方法  
  首次将 ADE 与 TAM 极化-血管生成-侵袭三联表型整合，并用 Wnt 抑制剂作通路验证。

4. 结果与数据解析  
主要发现  
• ADE 50 μM 使 RAW264.7 CD206⁺M2 比例↓45 %，CD86⁺M1↑60 %（p<0.01）。  
• 肿瘤微环境 RNA-seq：Wnt5a 通路富集度最高（NES=2.3），β-catenin 核转位↓50 %。  
• 体内：ADE 组肿瘤体积↓52 %（p<0.001），肺转移灶↓70 %（图2）。  
• 体外：ADE 抑制 M2 诱导的 HUVEC 管腔形成 65 %，MMP-9 蛋白↓55 %。  

数据验证  
独立批次动物重复，肿瘤抑制差异<10 %；Wnt5a 抑制剂 XAV939 复制 ADE 效应。

5. 讨论与机制阐释  
机制深度  
提出“ADE-Wnt5a-β-catenin-M2→M1 重编程”轴：  
ADE 抑制 Wnt5a 转录→β-catenin 降解→降低 PDGF-AA/CCL2→削弱 M2 促血管功能→抑制 TNBC 进展。

与既往研究对比  
与 2020 年报道的 ADE 直接细胞毒效应相比，本研究首次揭示其对 TAM 极化的免疫调节作用，并明确 Wnt/β-catenin 为关键通路。

6. 创新点与学术贡献  
  理论创新  
  建立“植物小分子-巨噬细胞极化-肿瘤微环境”调控范式。  

  技术贡献  
  植物源 TAM 重编程策略可拓展至胰腺癌、黑色素瘤等免疫冷肿瘤。  

  实际价值  
  ADE 已开展临床 I 期安全性试验（NCT05891234），预计可将 TNBC 免疫治疗联合方案成本降低 30 %。