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能"钻进"胚泡的干细胞:ES-E14TG2a
ES-E14TG2a是小鼠胚胎干细胞研究里的"功勋细胞":它缺失次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT/HPRT),对0.06 mM的6-硫鸟嘌呤有抗性——这个特性让它在经典的HAT筛选、基因打靶实验中极具价值。在饲养层(胚胎成纤维细胞或STO细胞)上培养能保持未分化;去掉饲养层它会自发分化形成胚胎结构;注入胚泡后还能进入生
基因打靶背后的明星:C57BL/6胚胎干细胞
C57BL/6小鼠胚胎干细胞是基因工程小鼠领域的"主力军"。植入C57BL/6-Tyrc-2J(c2J)囊胚时毛色嵌合率得率高,可高效进入生殖系,也能用于FVB/NJ宿主囊胚。ES细胞需要在含LIF(1000U/ml)的mES完全培养液中培养维持多能性,以CF-1 MEF等饲养层支持,呈球形克隆贴壁生长,1:4-1:7传代。做基因敲除、条件性敲除或转基因小鼠课题