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能进入生殖系的小鼠ES细胞D3
ES-D3(D3)是小鼠胚胎干细胞,在没有饲养层或条件培养基的情况下会自发分化为胚胎结构,注射回囊胚后能进入生殖系——这意味着通过基因靶向技术对其进行遗传修饰后,改造可稳定遗传给后代个体,是制备基因敲除小鼠的经典工具。未分化的D3细胞呈球形克隆贴壁生长,培养时需使用昆明白MEF(SCSP-101R)作为饲养层细
90%以上敲除克隆能进生殖系的R1细胞
R1建于1991年8月,取自129S1/SvImJ和129X1/SvJ两亚系交配获得的3.5天囊胚,多能性经四倍体胚胎检测验证。它最惊人的数据是:90%以上的敲除克隆能通过聚集嵌合体进入生殖系(n>60)——这意味着基因改造小鼠的构建成功率极高。将改造后的R1注射入C57囊胚或与CD-1、ICR 8细胞期胚胎聚集,都能高效产生生殖系传递
基因敲除小鼠的幕后功臣:ES细胞AB2.2档案
AB2.2 是一株小鼠胚胎干细胞系,球形克隆、贴壁生长,已广泛用于创建基因敲除小鼠。它的独特优势:HPRT负突变使其可用于染色体工程,且已被证明具有生殖能力,意味着它能够参与种系传递、产出基因修饰后代。培养时需要使用CF-1 MEF饲养层细胞和mES完全培养液(含ES级FBS、LIF、β-巯基乙醇等),本库冻存为P24代。做基因