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让基因自己"发光"，敲入这样做
做基因功能研究的朋友，十有八九都被"外源过表达"坑过：质粒转进去哗哗表达，结果和内源水平完全是两回事，数据看着漂亮、故事讲不圆今天这篇 STAR Protocols 给了标准答案——把 GFP 直接敲到基因的原位上，让蛋白在**自己启动子**的调控下表达，测到的荧光就是真实表达水平。以 Jurkat（T 细胞白血病经典细胞系
ROS检测翻车合集：避光没做好全白测
做氧化应激课题的姐妹看过来，DCFH-DA 荧光探针法一篇讲透原理一句话：脂溶性的 DCFH-DA 无荧光、能自由穿膜进细胞→被酯酶水解成亲水的 DCFH「困」在胞内→遇到 ROS（过氧化氢、羟自由基、过氧亚硝基阴离子等）被氧化成强绿色荧光的 DCF→测荧光就知道 ROS 水平。激发 ~488nm / 发射 ~525nm，荧光越强 ROS 越
小鼠原代 BMSC 分离 15 步，照着做就行
【开头钩子】原代 BMSC 分离第一次上手不知从哪下手？解剖取腿到铺板培养，15 步一条时间线全走完，每步都给你标好了【内容概览】✅ 前处理：后腿预冷 PBS 清洗 → 剔除肌肉，无菌操作不马虎✅ 冲髓：分离胫骨股骨、剪开两端，PBS 冲到髓腔发白✅ 过滤离心：70 μm 筛网过滤，300g 两次离心拿干净沉淀✅ 收尾：红裂