专为mES培养准备的"保姆细胞"️
ICR MEF是未处理的P0代饲养层(feeder)细胞,专门为培养小鼠胚胎干细胞(mES)设计。每支约3×10⁶个细胞,可铺3个T25或1个T75培养瓶,可传代至P3。作为胚胎干细胞的"保姆细胞",它提供营养支持和黏附基质,帮助mES维持未分化的多能状态。每个批次均通过支原体检测(阴性),是干细胞实验室的常备耗材。贴壁生长,1:4
携带LacZ报告基因的小鼠胚胎干细胞
B6/BLU是一株具有生殖能力的小鼠胚胎干细胞(mES),源自携带LacZ报告基因的C57BL/6转基因小鼠。它的转基因结构颇为精巧:在pUC19载体中,1.9 kb人5'4 HS-2片段位于标记的β-珠蛋白转基因上游。该细胞系每个批次均通过支原体检测(阴性),培养时需使用昆明白MEF(SCSP-101R)作为饲养层细胞。1:4~1:7传代、2~3天一次,
核型"异常"却活得很好的人胚胎干细胞
BG01V是一株具有异常核型(49, XXY, +12, +17)的人类胚胎干细胞系。虽然核型"不走寻常路",但当它在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(MEFs)上培养时,克隆仍显示均匀形态、可预测的生长速率,且在培养中易于维持;多能性标记和碱性磷酸酶活性呈阳性。这类细胞是研究非整倍体对干细胞多能性影响的独特材料——"不正常"
能"钻进"胚泡的干细胞:ES-E14TG2a
ES-E14TG2a是小鼠胚胎干细胞研究里的"功勋细胞":它缺失次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT/HPRT),对0.06 mM的6-硫鸟嘌呤有抗性——这个特性让它在经典的HAT筛选、基因打靶实验中极具价值。在饲养层(胚胎成纤维细胞或STO细胞)上培养能保持未分化;去掉饲养层它会自发分化形成胚胎结构;注入胚泡后还能进入生
会发绿光的干细胞,专为神经研究而生✨
想要实时看着干细胞往神经方向分化?G-Olig2就是为此而生。它通过把绿色荧光蛋白(GFP)插入Olig2基因——一个谱系特异性转录因子——构建而成。在神经分化的活细胞中,你能直接观察到GFP表达,相当于给神经元前体细胞的命运装了"探照灯"。细胞呈球形克隆、贴壁生长,用含LIF的mES完全培养液维持在未分化
能进入生殖系的小鼠ES细胞D3
ES-D3(D3)是小鼠胚胎干细胞,在没有饲养层或条件培养基的情况下会自发分化为胚胎结构,注射回囊胚后能进入生殖系——这意味着通过基因靶向技术对其进行遗传修饰后,改造可稳定遗传给后代个体,是制备基因敲除小鼠的经典工具。未分化的D3细胞呈球形克隆贴壁生长,培养时需使用昆明白MEF(SCSP-101R)作为饲养层细
能进入生殖系的ES细胞ESF 158
ESF 158来源于小鼠ESF-158品系的囊胚,是典型的胚胎干细胞——呈球形克隆贴壁生长,并且它能进入FVB/NJ(FVB)和C57BL/6-Tyrc-2J(c2J)供体囊胚的生殖系:植入c2J囊胚产生的毛色嵌合体数量较多,植入FVB囊胚产生的相对较少。这种生殖系传递能力使其成为遗传修饰小鼠制备的候选细胞。培养需在含LIF的mES完全培养液
能进入生殖系的小鼠ES细胞J1
J1来源于雄性鼠灰色的129S4/SvJae小鼠胚胎,是能高效进入生殖系的胚胎干细胞系——这意味着用J1做基因修饰后,改造能被稳定遗传给后代,是构建基因工程小鼠的可靠工具。培养时需要用CF-1 MEF(SCSP-105R)作为饲养层细胞,配合含LIF的mES完全培养液维持多能性,呈典型的球形克隆贴壁生长,1:4-1:7传代。想做基因敲
90%以上敲除克隆能进生殖系的R1细胞
R1建于1991年8月,取自129S1/SvImJ和129X1/SvJ两亚系交配获得的3.5天囊胚,多能性经四倍体胚胎检测验证。它最惊人的数据是:90%以上的敲除克隆能通过聚集嵌合体进入生殖系(n>60)——这意味着基因改造小鼠的构建成功率极高。将改造后的R1注射入C57囊胚或与CD-1、ICR 8细胞期胚胎聚集,都能高效产生生殖系传递
基因打靶背后的明星:C57BL/6胚胎干细胞
C57BL/6小鼠胚胎干细胞是基因工程小鼠领域的"主力军"。植入C57BL/6-Tyrc-2J(c2J)囊胚时毛色嵌合率得率高,可高效进入生殖系,也能用于FVB/NJ宿主囊胚。ES细胞需要在含LIF(1000U/ml)的mES完全培养液中培养维持多能性,以CF-1 MEF等饲养层支持,呈球形克隆贴壁生长,1:4-1:7传代。做基因敲除、条件性敲除或转基因小鼠课题