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过表达GADD45的结肠癌细胞,DNA修复更"勤快"
RKO-AS45-1是从结肠癌RKO细胞系转染而来:将人cDNA中GADD45的开放阅读框克隆到pCMV表达载体中,稳定整合到RKO细胞基因组。GADD45是受p53调控的重要基因,其蛋白产物参与细胞周期调控和DNA修复。这株细胞可与亲本RKO配对,研究GADD45对DNA修复、细胞凋亡和药物敏感性的影响——是p53-GADD45信号通路研究的实用工具
一支"关掉"p53的结肠癌细胞
RKO-E6是用脂质体法把pCMV-E6转染进结肠癌RKO细胞获得的转基因株,稳定整合了巨细胞病毒启动子调控的HPV E6癌基因。由于E6蛋白会降解p53,这株细胞缺乏明显的p53功能性:紫外线诱导的DNA损伤修复减少、修复能力丧失。它与含野生型p53的亲本RKO构成一对理想的对照组合,是研究p53缺失对转录、凋亡和DNA损伤修复影响的经典工具
p53野生型的结肠癌模型:RKO细胞
RKO是由Michael Brattain建立的低分化结肠癌细胞系,也是RKO-E6和RKO-A545-1的亲本系。它含有野生型p53,蛋白水平高于RKO-E6,是研究p53和gadd45调控细胞周期的理想对照细胞。细胞缺乏内源性人甲状腺受体核受体(h-TRbeta1),可在裸鼠体内成瘤,也能在软琼脂中形成集落。上皮样、贴壁生长,MEM+10%FBS+1%NEAA培养,1:3传代