多重免疫组化mIHC流程!27步从烤片到封片

2026年10月23日浏览 2来源:本站

多重免疫组化(mIHC)还不会做?以 Alpha Bas 试剂盒为例,FFPE 样本全流程 27 步整理好了准备:10% 中性福尔马林固定 8-48h 最佳,切片 3-4μm 防脱载玻片;工作液务必使用前半小时内配!预准备:60℃ 烤片 60min → 二甲苯脱蜡 ×3 → 梯度乙醇水化 → 微波抗原修复(预热5min-高火2min-低火15min)自

多重免疫组化(mIHC)还不会做?以 Alpha Bas 试剂盒为例,FFPE 样本全流程 27 步整理好了
准备:10% 中性福尔马林固定 8-48h 最佳,切片 3-4μm 防脱载玻片;工作液务必使用前半小时内配!
预准备:60℃ 烤片 60min → 二甲苯脱蜡 ×3 → 梯度乙醇水化 → 微波抗原修复(预热5min-高火2min-低火15min)自然冷却
染色循环:封闭15min → 一抗 37℃ 1h(或4℃过夜)→ 二抗 10min → 荧光显色 5min → 微波洗脱重复——每个抗体重复这个循环,依次完成所有抗体染色
若不做 Bas Cy7:走 BIOTIN 分支(16-24 步)
最后 DAPI 复染 5min、抗荧光淬灭封片剂封片✅
避坑:PH 值影响染色、载玻片要无酸碱污染、抗体最适浓度先做梯度测试、染色后及时成像避光保存

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