淋巴结被肿瘤"寄信"了？离心就看到

做肿瘤转移方向的朋友，肯定绕不开一个问题：肿瘤还没转移到淋巴结的时候，淋巴结里面到底发生了什么？
常规思路是把淋巴结整个裂解了做 Western 或蛋白组，但这样一来，真正的主角——胞外蛋白——早就被大量胞内蛋白"淹没"了。
今天这篇 STAR Protocols 给了个很聪明的做法：低速离心分离组织液（ISF）
操作其实不难：完整组织放到 20μm 滤网上，加点 PBS，150×g 离心 10 分钟、4°C，组织液就被轻轻"挤"到管底了。
最妙的是
✅ 离心后细胞活力不变
✅ 组织结构完整（免疫荧光验证过）
✅ 剩下的组织还能接着做流式、免疫荧光、单细胞测序
等于一份样本，既拿到胞外蛋白组，又保留细胞层面的信息，一鱼两吃
产量参考：正常淋巴结 2–4 μL，肿瘤引流淋巴结 8–10 μL，500 mg 肿瘤约 50 μL——够上质谱了。
作者用的是小鼠乳腺癌模型（4T1 vs 67NR，转移 vs 非转移），从原位接种、取材，到酶解、DIA 质谱、DIA-NN 分析、火山图 UMAP 热图出图，全流程标准化。质谱数据在 PRIDE 开源，R 分析模板在 Zenodo 直接下载，复现门槛很低。
几个小提醒⚠️
· 淋巴结体积小，取样务必完整，血管碰破会很麻烦
· PBS 只加 10 μL，别多加，稀释了影响定量
· 高温天记得封口膜盖住滤网，防止蒸发
适合人群：肿瘤微环境、转移前龛（pre-metastatic niche）、淋巴结重塑方向的同学。做感染、免疫方向其实也能套用，患者来源淋巴结样本作者也验证过可行性。
需要文献解读或技术细节的，评论区聊～