养胚胎干细胞前，先认识这只"铺床"的细胞——MEF
养过胚胎干细胞的宝子，一定绕不开一位"幕后功臣"——小鼠胚胎成纤维细胞MEF！它是未处理的P0原代饲养层细胞，最大的使命就是给胚胎干细胞（mES）当"床垫"：提供贴壁基质和生长因子，让干细胞安安稳稳地增殖分化。一支细胞量就有3×10⁶，大约能铺3个T25或1个T75培养瓶，用它铺饲养层，性价比超高～不过
养过胚胎干细胞的宝子，一定绕不开一位"幕后功臣"——小鼠胚胎成纤维细胞MEF！
它是未处理的P0原代饲养层细胞，最大的使命就是给胚胎干细胞（mES）当"床垫"：提供贴壁基质和生长因子，让干细胞安安稳稳地增殖分化。一支细胞量就有3×10⁶，大约能铺3个T25或1个T75培养瓶，用它铺饲养层，性价比超高～
不过要注意，MEF一般只能传代到P3，次数多了会老化衰退，记得趁年轻"上岗"哦！培养用DMEM+10%FBS，1:4-1:7传代，2-3天一代，节奏很友好。
搞干细胞、基因敲除小鼠的宝子，评论区说说你用过几代内的MEF？
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