圈白细胞看 CD45:流式面板里的必备通道(人源样品)
流式圈门第一步是把白细胞从碎渣里拎出来,CD45 就是干这个的。可小鼠 CD45 的剪接变体多,有的克隆认全型,有的偏向 B220,标记错了门内亚群会跟着偏。荧光素选得和别的通道撞车,后面补偿又是一晚上。
CD45(PTPRC)是白细胞共同抗原,一种跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶,几乎所有造血细胞都表达。它有多个剪接变体(如 CD45RA、CD45RO、B220),不同克隆识别的表位不一样。在小鼠里,CD45 是圈白细胞门、排除非造血细胞的标配。
这一组产品针对的抗原是 CD45,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 555485(BD Pharmingen™ APC Mouse Anti-Human CD45),Mouse IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 这款 555482,品名是 BD Pharmingen™ FITC Mouse Anti-Human CD45,Mouse IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 FITC,验证应用覆盖 FCM。
再看 BD Pharmingen 的 557833:BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Mouse Anti-Human CD45,Mouse IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC-Cy7,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
圈总白细胞选全型识别的克隆,别用亚型特异的克隆干这个活。荧光素按面板搭配,表达量高的标志可以用 FITC、PerCP 这类常规通道,把强通道留给弱表达的。组织消化样品注意酶处理可能影响表位,挑耐受性好的克隆。上全色面板前先用单染管定补偿和电压。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 555485 | BD Pharmingen™ APC Mouse Anti-Human CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 555482 | BD Pharmingen™ FITC Mouse Anti-Human CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 557833 | BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Mouse Anti-Human CD45 | CD45 |