WB 内参 GAPDH:单抗、多抗、直接 HRP,哪个适合你(人源/小鼠样品)
做 WB 的人大概都遇到过这种场面:目的蛋白条带纠结了大半天,一上内参——GAPDH 深得发黑,或者浅得要拿放大镜看。内参不稳定,后面所有归一化都是空谈。GAPDH 大概是全球实验室消耗量最大的抗体之一,选型看着简单,其实坑不少。
GAPDH 是糖酵解通路里的管家蛋白,几乎所有组织细胞里都稳定表达,所以成了 WB、免疫荧光里最常用的上样对照。但它并非在所有条件下都纹丝不动:缺氧、高糖刺激、细胞周期变化都可能让它的表达量轻微浮动。另外它有 36 kDa 左右的单一条带,跑胶干净,判读省心。
这一组产品针对的抗原是 GAPDH,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab8245(Anti-GAPDH antibody [6C5] - Loading Control),Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500-1/10000。
proteintech 这款 10494-1-AP,品名是 GAPDH Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。
再看 abclonal 的 AC002:GAPDH Mouse mAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
Abcam 的 Ab37168 值得单独说说——Anti-GAPDH antibody - Loading Control,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC。
接下来是 abclonal 的 A19056(GAPDH Rabbit mAb(High Dilution)),验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
abclonal 的 AC001(GAPDH Rabbit pAb),验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC、IP。
abclonal 这款 AC033,品名是 GAPDH Mouse mAb (High Dilution),验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
再看 Abcam 的 AB9482:HRP Anti-GAPDH antibody [mAbcam 9484] - Loading Control,Mouse / IgG2b 来源,属单克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/5000。
到底怎么选?
如果你只是跑 WB 看看上样齐不齐,直接标记 HRP 的版本最省事,省掉二抗孵育和洗膜。需要做免疫荧光或 IHC 的话,选未偶联的抗体搭配荧光二抗更灵活。单抗批次间更稳,多抗通常识别多个表位、耐受性更好。样品是人、小鼠、大鼠的话主流产品都覆盖;做特殊物种记得先核对反应种属。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab8245 | Anti-GAPDH antibody [6C5] - Loading Control | GAPDH |
| proteintech | 10494-1-AP | GAPDH Polyclonal antibody | GAPDH |
| abclonal | AC002 | GAPDH Mouse mAb | GAPDH |
| Abcam | Ab37168 | Anti-GAPDH antibody - Loading Control | GAPDH |
| abclonal | A19056 | GAPDH Rabbit mAb(High Dilution) | GAPDH |
| abclonal | AC001 | GAPDH Rabbit pAb | GAPDH |
| abclonal | AC033 | GAPDH Mouse mAb (High Dilution) | GAPDH |
| Abcam | AB9482 | HRP Anti-GAPDH antibody [mAbcam 9484] - Loading Control | GAPDH |