p-p65 (S536) 抗体横评:炎症信号怎么读出来(人源样品)
TNF-α 或 LPS 刺激完,想用 p65 磷酸化来证明 NF-κB 通路被激活,结果 WB 上总 p65 一抓一个准,p-p65 死活不出来。问题多半出在样品处理或对照设计上,不一定是抗体的锅。
RelA(p65)是 NF-κB 家族的核心亚基,Ser536 位点磷酸化和它的转录活性、核内停留时间都有关系。相比只看核转位,磷酸化读出能多给一层信息:通路不仅被叫醒了,还在持续输出信号。炎症、肿瘤、天然免疫研究里这个位点出现频率很高。
这一组产品针对的抗原是 RELA pS536,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab86299(Anti-NF-kB p65 (phospho S536) antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。
Abcam 这款 Ab28856,品名是 Anti-NF-kB p65 (phospho S536) antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。
到底怎么选?
裂解液加磷酸酶抑制剂,刺激时间梯度(5、15、30 分钟)摸一遍,峰值错过就全盘皆输。WB 配总 p65 一起跑,两条带对照着看才有说服力。做 IF 看核转位加磷酸化的话,选厂家验证过该位点的产品,固定条件也会影响信号。样品是人或小鼠的,挑明确标了对应反应种属的抗体。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab86299 | Anti-NF-kB p65 (phospho S536) antibody | RELA pS536 |
| Abcam | Ab28856 | Anti-NF-kB p65 (phospho S536) antibody | RELA pS536 |