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单细胞层面找出心肌必需的基因

做心脏研究的朋友看过来 今天这篇 STAR Protocols 讲的是怎么在心肌细胞分化过程中做全基因组的 Perturb-Seq——简单说,就是一边让干细胞变成心肌细胞,一边把所有转录因子挨个"静音",看少了哪个基因细胞就长不好这个实验难在哪?分化过程中细胞状态一直在变,基因敲完可能细胞直接死掉、数据就缺一块。这套方案

KRAS突变肺癌的CRISPR利器!NCI-H358Cas9-copGFP-1

KRAS突变是肺腺癌里的"钉子户"靶点,而NCI-H358正是一款携带KRAS突变的经典肺腺癌细胞系 现在它的Cas9编辑版本来了——NCI-H358Cas9-copGFP-1!Cas9表达盒稳稳地插在AAVS1安全位点,嘌呤霉素筛选后表达非常稳定,还自带copGFP荧光方便监控。在KRAS靶向药物研发火热的当下,用它来敲除候选基因、验证耐药机制或者筛

NCI-H1299Cas9的"双胞胎"!copGFP-2单克隆株解析

科研人都知道单克隆株之间可能有差异,所以独立验证超重要 NCI-H1299Cas9-copGFP-2是与copGFP-1平行的另一个单克隆株,同样的Cas9表达盒敲入AAVS1安全位点,同样的嘌呤霉素筛选和copGFP荧光报告,但来自独立的单细胞克隆。用它和copGFP-1做平行实验,可以有效排除克隆特异性效应,让你的基因编辑结果更 robust 追求实验可重

肺癌CRISPR双杀!NCI-H1299Cas9-copGFP-1细胞解析

NCI-H1299本身就是肺癌研究里的"网红"细胞——p53缺失、KRAS突变,遗传背景特别适合做功能恢复和基因互作研究 现在它的Cas9升级版来了!NCI-H1299Cas9-copGFP-1把Cas9表达盒精准敲入AAVS1安全位点,经过嘌呤霉素严格筛选,Cas9表达稳如老狗 还带copGFP绿色荧光报告,转染效率好不好一眼就能判断。p53缺失背景叠加

✨ AAVS1安全港敲入!这款A549Cas9细胞编辑更安心

做CRISPR的姐妹一定懂:Cas9表达不稳定真的让人崩溃 A549Cas9-copGFP-1来拯救你的实验啦!它用非病毒质粒通过同源重组,把Cas9表达盒精准敲入AAVS1安全位点——这个位点被誉为基因组里的"保险箱" 不会影响其他基因表达,编辑更安心。而且它同时表达copGFP绿色荧光蛋白和嘌呤霉素抗性,编辑效率好不好,荧光显微镜

CRISPR编辑神器!A549Cas9-A33让基因敲除效率翻倍

科研姐妹们看过来 A549Cas9-A33简直是基因编辑实验室的"外挂"细胞!它在经典肺癌细胞A549的基础上稳定表达了Cas9蛋白,省去了每次转染Cas9质粒的麻烦,CRISPR敲除效率直接起飞✈️ 这款细胞系通过敲除GFP序列筛选获得,自带嘌呤霉素抗性标记,做起基因编辑实验来简直不要太顺手~无论是构建基因敲除模型,还是做功能筛选,它

病毒进门,靠两个糖把手

马鼻病毒A型(ERAV)和口蹄疫病毒是近亲,它进细胞用哪个受体,悬了很多年。乌特勒支大学团队用全基因组CRISPRi筛选找到答案:整合素α2β1。敲除细胞抗感染、抗体阻断有效、可溶性受体能竞争——四重验证,身份坐实。真正精彩的是冷冻电镜看到的画面:病毒以闭合构象抓住α2链的β螺旋桨,

用基因驱动让蚊子灭绝?CRISPR 真的能改写进化规则

想象一下:你能设计出一种基因,让它在自然界中疯狂自我复制,最终让一个物种彻底灭绝。这听起来像科幻小说,但用 CRISPR 改造的基因驱动(gene drive)正在把它变成现实。打破孟德尔遗传规则正常情况下,一个基因在种群中的传递遵循孟德尔定律:如果父母一方携带这个基因,它传给后代的概率是 50%。如果这个基因没有什

【文献解析】通过全基因组CRISPR筛选鉴定人类细胞中芳香烃受体信号通路的调节因子

1. 领域背景与文献文献英文标题:Identification of regulators of aryl hydrocarbon receptor signaling in human cells by genome-scale CRISPR screening;发表期刊:Genome Biol;影响因子:未公开;研究领域:芳香烃受体信号调控与疾病分子机制研究;芳香烃受体是一种可整合来自环境、肠道微生物及内源性来源化学信号的

【文献解析】全基因组CRISPR筛选鉴定FOXJ3通过OTUD5依赖的GSTP1稳定化作为肝细胞癌铁死亡调控因子

1. 领域背景与文献核心信息段:文献英文标题:Genome wide CRISPR screening identifies FOXJ3 as a regulator of ferroptosis in hepatocellular carcinoma via OTUD5 dependent stabilization of GSTP1;发表期刊:Cell Commun Signal;影响因子:未公开;研究领域:肿瘤学,肝细胞癌铁死亡调控机制。领域共识:肝细胞癌是