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帕金森热点 LRRK2,活性这样测才靠谱

做帕金森研究的小伙伴,对 LRRK2 肯定不陌生这个激酶的致病突变(尤其 G2019S)和帕金森病强相关,而它最经典的"工作成果",就是把 Rab10 的第 73 位苏氨酸磷酸化——pRab10 于是在溶酶体附近形成一个个清晰的小点,正好适合拿显微镜数一数。今天这篇 STAR Protocols 给出了一套完整的高内涵成像流程,几个设计我

抗体怎么选?到底谁抗谁啊

【开头钩子】买抗体只看品牌和靶蛋白名称?难怪 WB 条带总是不对劲。下单前这 8 条逐条过一遍,能帮你省下不少冤枉钱。【内容概览】① 先看 Applications:厂家验证过哪些应用(WB / IF / ICC / IHC / IP / ChIP / FC),WB 认线性表位、IF/IP 认构象表位,WB 好用的抗体 IP 未必拉得下来② Species Reactivity:区分 Val

IHC/IF样本准备避雷帖!切片爬片滴片全要求

免疫组化/免疫荧光实验,样本不合格=白做!这份样本准备档案卡请收好石蜡切片:放置不能超半年,否则抗原丢失可能假阴性,有蜡块最好重切冰冻切片:厚度≤10μm、-20℃ 保存,超三个月抗原丢失严重,20μm 厚片易掉片+抗体不易进入细胞爬片:密度最好 10⁵,6 孔板密度 50-70% 再爬;组化别用 12 孔板或更小!PFA 固定

ELISA/WB/IF/IHC对比表!做完实验才不踩坑

新生必存!四大蛋白检测方法一次分清ELISA:定量王者,pg/mL 级灵敏度,但只能测可溶性分泌蛋白、无法定位WB:看分子量和亚型,验证蛋白表达,半定量、步骤多耗时长IF/ICC:荧光定位蛋白在细胞里的位置(膜/核/质),直观但易淬灭IHC:组织原位定位,保留形态信息,临床病理研究主力,半定量主观性强一张表从检测原理、目标