线粒体也能流式分选了?
做线粒体研究的朋友应该都遇到过同一个尴尬:差速离心收下来的线粒体是"一锅端"的,功能强的弱的混在一起,测出来全是平均值今天这篇 STAR Protocols 给了一个很聪明的解法——FAMS,荧光激活线粒体分选。思路其实借的是流式的老逻辑:在细胞里装一个 split-GFP"接触开关"(SPLICS),一半锚在内质网上、一半锚在
流式细胞术染色 SOP,表面+胞内全步骤
【开头钩子】流式染色总是不知道先加染料还是先加抗体?表面染色两套方案 + 胞内染色全流程,每一步参数都标好了【内容概览】✅ 表面染色方案①:Phantom Dye 死活染料,10 步走完✅ 表面染色方案②:7-AAD 染料,只能染活细胞、染完迅速上机✅ 胞内染色:固定破膜分「胞内靶标」和「核内靶标」两条路✅ 关键参数:2-8&de
流式圈门总翻车?四关顺序抄作业
圈门没有万能模板,但有一条稳定主线:先把不该进入分析的事件排掉,再回答目标细胞是谁、状态如何第一关 · 先去粘连:别把双联体、多联体当一个细胞统计。用 FSC-A 对 FSC-H 或 FSC-W,保留沿对角线排列的单细胞群;细胞周期实验常用 A/W 组合去双联体更彻底。核心判断:单个细胞面积和高度比例稳定,粘连体比例异
流式 vs ELISA测因子:谁在分泌 vs 分泌了多少
胞内流式和 ELISA 都能测细胞因子,到底选哪个?先说结论:流式(胞内)看的是「谁在分泌」,ELISA 看的是「分泌了多少」,两者相辅相成!胞内流式:体外刺激细胞(PMA、离子霉素等),固定破膜后荧光抗体内染色,看某类免疫细胞(如 CD3⁺T)分泌因子的占比,能分亚群但只能半定量。ELISA:双抗体夹心法直接定量上清/血清中
CD3/CD4/CD8 记不住?师姐一图给你讲透
每次看流式结果都被 CD 编号绕晕?这篇带你 5 分钟入门CD 是啥:全称 Cluster of Differentiation(分化簇),也叫白细胞分化抗原——说白了就是免疫细胞表面的「身份标签」。370 多种了,科研、临床、肿瘤免疫治疗(比如 CAR-T)全靠它们当靶点。流式怎么用它认细胞:用带荧光的抗体结合 CD 分子,仪器一测就
流式分选圈门逻辑,7步一线直达目标细胞
流式分选不会圈门?这条「圈门线路」带你从 All Events 一路开到目标细胞????01 初筛细胞群:FSC-A × SSC-A → P1,把细胞和碎片分开02 筛除黏连体:FSC-A × FSC-H → P2,只要单细胞03 选择活细胞:Live 染料低信号 → P3,死细胞请出局04 选择双阴性群:CD45⁻ / TER119⁻ → P4,排除免疫细胞