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免疫组化全套protocol！13小步从切片到封片
一份能直接照着做的免疫组化完整 protocol，从切片到封片 13 小步全流程前处理：连续 3-4μm 切片 → 60℃ 烤片 1-2h → 过缸脱蜡水化（二甲苯 10min×3 → 梯度酒精各 5min）→ 微波抗原修复（低火5min-中火5min-高火10min，时间只多不少，降至室温静置≥2h）→ 3%H2O2 阻断 30min → 组
免疫组化染成「一片红」？8个翻车点逐个排查
做免疫组化最崩溃的瞬间：整张片子脏脏一片红 别急着怪抗体，8 个高频翻车点逐个排查1️⃣ 用了多抗 → 换高纯度单抗，背景干净很多2️⃣ 抗体浓度过高/孵育过长 → 预实验摸浓度，加完抗体立刻上定时器3️⃣ DAB 显色太久/变质 → 显微镜下盯着，浅棕立刻冲；DAB 现用现配，临用前才加 H2O24️⃣ 内源性酶和生