细胞连接看 ZO-1:染色怎么才能线形清楚(人源/小鼠/大鼠样品)
做肠屏障、血脑屏障、上皮极性的同学,ZO-1 染色是看板图。理想中它该沿着细胞边缘画出漂亮的网格线,实际染出来要么断断续续,要么整个胞质发糊。样品固定稍过头,线形信号就散了。
ZO-1(基因名 TJP1)是紧密连接的胞内支架蛋白,把 claudin、occludin 这些跨膜组分拴到肌动蛋白骨架上,维持上皮屏障的完整性。它的定位直接反映连接组装状态:连续线形是屏障完好,断裂、弥散往往提示通透性增加或上皮表型松动。
这一组产品针对的抗原是 TJP1,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab96587(Anti-ZO1 tight junction protein antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。
Abcam 这款 Ab221547,品名是 Anti-ZO1 tight junction protein antibody [EPR19945-296],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 IHC、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500。
再看 abclonal 的 A0659:ZO-1 Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC。
到底怎么选?
免疫荧光是主场,选对固定条件验证过的产品,低浓度多聚甲醛往往比强固定更适合膜蛋白定位。共染搭配 occludin 或 claudin-4 一起看连接组分更完整。WB 约 220 kDa,大蛋白转膜要给足时间。做屏障功能研究,把染色和 TEER、通透性实验配起来更有说服力。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab96587 | Anti-ZO1 tight junction protein antibody | TJP1 |
| Abcam | Ab221547 | Anti-ZO1 tight junction protein antibody [EPR19945-296] | TJP1 |
| abclonal | A0659 | ZO-1 Rabbit pAb | TJP1 |