NeuN 抗体横评:神经元染色的几个坑(人源/小鼠样品)
做脑缺血、神经退行、神经毒性实验,几乎都要数神经元。手动数 Nissl 染色数到眼花还容易有偏差,NeuN 免疫荧光就成了标配。可神经组织自发荧光强,抗体背景一高,图片糊成一片,计数根本没法做。
NeuN(基因名 RBFOX3)是神经元核抗原,主要在成熟神经元的细胞核和核周质里表达,胶质细胞基本不着色,拿来数神经元特异性很好。它不是所有神经元都标记,小脑浦肯野细胞、视网膜感光细胞这些类型就是阴性的,读结果时别当丢失。WB 里约 46-48 kDa,有时能看到双带。
这一组产品针对的抗原是 NeuN,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab104224(Anti-NeuN antibody [1B7] - Neuronal Marker),Mouse / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/2000。
Abcam 这款 Ab104225,品名是 Anti-NeuN antibody - Neuronal Marker,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF-FRO、IHCFl。
再看 Abcam 的 Ab190565:Alexa Fluor® 647 Anti-NeuN antibody [EPR12763] - Neuronal Marker,Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/50。
proteintech 的 66836-1-Ig 值得单独说说——NeuN Monoclonal antibody,Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF-P。
到底怎么选?
组织免疫荧光优先选对石蜡或冰冻切片验证过的产品,不同克隆识别的表位可能有差别。多色染色时把 NeuN 和 GFAP、Iba1 排在一起,神经元-胶质全景一目了然。宿主种属错开好搭二抗。做定量计数的话,背景和信号均匀性比单纯亮度更重要,太亮反而分不开核。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab104224 | Anti-NeuN antibody [1B7] - Neuronal Marker | NeuN |
| Abcam | Ab104225 | Anti-NeuN antibody - Neuronal Marker | NeuN |
| Abcam | Ab190565 | Alexa Fluor® 647 Anti-NeuN antibody [EPR12763] - Neuronal Marker | NeuN |
| proteintech | 66836-1-Ig | NeuN Monoclonal antibody | NeuN |