IgG1 亚型二抗怎么挑:特异性是关键(人源样品)

IgG1 亚型二抗怎么挑:特异性是关键(人源样品)

多色流式或者亚类特异性检测里,买二抗只看“抗小鼠 IgG”是不够的——亚型不对,整条链路就是空的。IgG1 是单抗最常见的亚型,可人源和小鼠源 IgG1 的恒定区结构不一样,二抗不能互换着用。

IgG1 二抗识别的是 IgG 重链的 γ1 恒定区(Cγ1)。小鼠 IgG1 和人 IgG1 的同源性有限,抗小鼠 IgG1 与抗人 IgG1 是两个产品,交叉验证数据都要看清楚。做亚类分型、二抗桥接、IP 后检测,都靠这类抗体。

Abcam Ab109489
图:Abcam Ab109489 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab109489
图:Abcam Ab109489 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab6759
图:Abcam Ab6759 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab2410
图:Abcam Ab2410 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 IGHG1,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab109489(Anti-Human IgG antibody [EPR4421]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。

Abcam 这款 Ab6759,品名是 Rabbit Anti-Human IgG H&L (HRP),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、cELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/130000。

再看 Abcam 的 Ab97225:Goat Anti-Human IgG Fc (HRP),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/25000。

Abcam 的 Ab2410 值得单独说说——Anti-Human IgG antibody,Rabbit / Unknown 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 IHC。

到底怎么选?

先认准检测对象的宿主:小鼠一抗配抗小鼠 IgG1,人源一抗配抗人 IgG1,别按“IgG1”字面通用。WB 还原条件下重链约 50 kDa,轻链在 25 kDa 附近。IP 后检测要选和一抗宿主不冲突的方案,必要时用片段化二抗。偶联形式按平台选,流式看荧光素搭配,WB 看 HRP 或近红外。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab109489 Anti-Human IgG antibody [EPR4421] IGHG1
Abcam Ab6759 Rabbit Anti-Human IgG H&L (HRP) IGHG1
Abcam Ab97225 Goat Anti-Human IgG Fc (HRP) IGHG1
Abcam Ab2410 Anti-Human IgG antibody IGHG1

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