FLAG 标签抗体怎么挑：DDDDK 表位的那几款

转染做完想验证 FLAG 融合蛋白，抗体一抗上去信号有，杂带也有一堆。DDDDK 就是 FLAG 标签的核心表位序列，标“抗 FLAG”和“抗 DDDDK”的其实是同一类东西，克隆之间的识别方式差别却不小。做 WB、IP 还是免疫荧光，挑法不一样。

DDDDK 是 FLAG 标签里的一段 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列，也就是常说的 FLAG 表位。抗这类标签的抗体能检测融合蛋白的表达、定位和纯化。有的克隆依赖表位末端的游离状态，融合标签放在 N 端还是 C 端，设计时就要考虑进去。

这一组产品针对的抗原是 DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence)，反应种属：标签蛋白（无特定反应种属限制）。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点，挨个说

Abcam 的 Ab205606（Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [EPR20018-251]），Rabbit / IgG 来源，属单克隆抗体，验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500-1/5000。

Abcam 这款 Ab1162，品名是 Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody，Rabbit / IgG 来源，属多克隆抗体，验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC。

再看 Abcam 的 Ab49763：HRP Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [M2]，Mouse / IgG1 来源，属单克隆抗体，标记形式为 HRP，验证应用覆盖 WB、ELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500-1/10000。

Abcam 的 Ab125243 值得单独说说——Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [FG4R]，Mouse / IgG2b 来源，属单克隆抗体，验证应用覆盖 WB、ELISA、IP、Dot、ISH。

到底怎么选？

WB 选在变性样品上验证过的产品，转染 24-48 小时的裂解液信号最直观。IP 或检测天然复合物，看厂家有没有标注 IP 级验证。纯化用标签抗体做亲和填料，检测再换另一个克隆，分工更清楚。做双标签实验时把两支抗体的宿主种属错开。

相关产品列表

品牌	货号	品名	抗原名称
Abcam	Ab205606	Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [EPR20018-251]	DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence)
Abcam	Ab1162	Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody	DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence)
Abcam	Ab49763	HRP Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [M2]	DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence)
Abcam	Ab125243	Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [FG4R]	DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence)