Chicken IgY 二抗怎么挑:多重染色的第三通道

Chicken IgY 二抗怎么挑:多重染色的第三通道

多重免疫荧光做到第三、第四色,宿主种属就开始不够用了。鸡源 IgY 二抗正好能把通道腾出来,可它和哺乳动物 IgG 交叉反应少,也意味着用错方案时信号直接消失。装错二抗返工,一晚上就没了。

IgY 是鸟类的抗体类型,功能上相当于哺乳动物的 IgG,从蛋黄里提,不跟哺乳动物 Fc 受体结合。这个特性让它在多重染色里非常干净,非特异结合少。抗鸡 IgY 的二抗专一识别鸡源一抗。

Abcam Ab150169
图:Abcam Ab150169 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab150169
图:Abcam Ab150169 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab150173
图:Abcam Ab150173 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab150173
图:Abcam Ab150173 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 Chicken IgY,反应种属:Chicken。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab150169(Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 488)),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。

Abcam 这款 Ab150173,品名是 Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 488) preadsorbed,Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。

再看 Abcam 的 Ab150171:Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 647),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。

到底怎么选?

确认一抗是鸡来源再下单,鸡 IgY 二抗不认兔、小鼠一抗。多重染色里鸡源一抗占一通道,兔和小鼠各占一通道,串色风险最低。二抗选直接偶联荧光素的版本,省掉三抗。ELISA 或 WB 用的稀释比例和 IF 不同,看厂家分应用标注。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab150169 Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 488) Chicken IgY
Abcam Ab150173 Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 488) preadsorbed Chicken IgY
Abcam Ab150171 Goat Anti-Chicken IgY H&L (Alexa Fluor® 647) Chicken IgY

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