微管骨架里的 α-tubulin:抗体怎么选(人源样品)

微管骨架里的 α-tubulin:抗体怎么选(人源样品)

α-tubulin 做 WB 内参的频率大概仅次于 GAPDH,很多人觉得随便买一支就行。直到有一天发现条带位置偏了、信号忽强忽弱,才意识到 tubulin 家族有多个亚型,抗体识别的表位不完全一样。

TUBA4A 编码 α-tubulin 的一个亚型,和 β-tubulin 组成异源二聚体,聚合形成微管。微管是细胞骨架的"高速公路",参与细胞分裂、胞内运输和形态维持。α-tubulin 在大多数细胞里稳定高表达,所以也常被当作上样对照。但要注意它在不同细胞类型和处理条件下的表达量并非绝对不变。

Abcam Ab15246
图:Abcam Ab15246 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab15246
图:Abcam Ab15246 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab48389
图:Abcam Ab48389 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab176560
图:Abcam Ab176560 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 TUBA4A,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab15246(Anti-alpha Tubulin antibody - Loading Control),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。

Abcam 这款 Ab48389,品名是 Anti-Detyrosinated alpha Tubulin antibody - Loading Control,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。

再看 Abcam 的 Ab176560:Anti-alpha Tubulin antibody [EPR13478(B)] - Loading Control,Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/10000。

到底怎么选?

做 WB 内参的话,选对多物种验证过的抗体最省心。有些 α-tubulin 抗体同时识别多个亚型(TUBA1A、TUBA1B、TUBA4A 等),条带更亮但也可能出双带。免疫荧光看微管网络需要抗体能识别天然构象。做有丝分裂研究时,磷酸化修饰可能影响表位,注意选择不受修饰影响的克隆。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab15246 Anti-alpha Tubulin antibody - Loading Control TUBA4A
Abcam Ab48389 Anti-Detyrosinated alpha Tubulin antibody - Loading Control TUBA4A
Abcam Ab176560 Anti-alpha Tubulin antibody [EPR13478(B)] - Loading Control TUBA4A

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