Fc Block 抗体横评:非特异染色怎么压(小鼠样品)
小鼠流式染免疫细胞,背景高到阳性群阴性群分不开时,多数人第一反应是调补偿、调电压。其实先想一步:Fc 受体阻断做了吗?巨噬细胞、树突细胞、B 细胞表面的 Fc 受体会抓抗体的 Fc 段,不阻断的话,信号一大半是假的。
Fc Block 是封闭 Fc 受体的试剂,常用抗 CD16/32 抗体,先和细胞孵育,把抗体非特异结合的位点占住。这类试剂专为小鼠细胞设计,是小鼠免疫细胞流式的常备品。它不标记任何抗原,作用是把背景压下来,让真正的抗原信号浮出来。
这一组产品针对的抗原是 BD Fc Block),反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 553142(BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 (Mouse BD Fc Block™)),Rat SD 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 FCM、IF-FRO、IP、Blocking。
BD Pharmingen 这款 553141,品名是 BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 (Mouse BD Fc Block™),Rat SD 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 FCM、IF-FRO、IP、Blocking。
到底怎么选?
小鼠免疫细胞流式几乎必备,和染色抗体分开孵育,别混在同一管里。用量按细胞数走,通常 10^6 个细胞一支的量级,具体看说明书。对某些亚群(比如嗜酸性粒细胞、特定巨噬细胞)可能还要叠加更严格的封闭方案。大鼠或人样品不能直接拿小鼠 Fc Block 顶替,要选对应种属的阻断试剂。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 553142 | BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 (Mouse BD Fc Block™) | BD Fc Block) |
| BD Pharmingen | 553141 | BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 (Mouse BD Fc Block™) | BD Fc Block) |