p-AKT (Ser473) 抗体横评：样品处理决定成败（人源/小鼠/大鼠样品）

做 PI3K/AKT 通路的人常碰到这种局面：总 AKT 条带整整齐齐，p-AKT 那一栏却是空白，或者时有时无。刺激条件、裂解液、抗体三个环节任何一个没到位，磷酸化信号就直接蒸发。买 Ser473 位点抗体之前，得先把实验设计捋清楚。

AKT 的激活靠两个位点磷酸化：Thr308 由 PDK1 催化，Ser473 由 mTORC2 催化，两个都到位才完全活化。Ser473 磷酸化水平常被当作 PI3K 通路被激活的读出，在肿瘤、代谢、存活信号研究里用得很多。它半衰期短，刺激后几分钟就起来，错过窗口就测不到。

这一组产品针对的抗原是 AKT1 phospho S473，反应种属：Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点，挨个说

Abcam 的 Ab81283（Anti-AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]），Rabbit / IgG 来源，属单克隆抗体，验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、Dot。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/5000-1/10000。

Abcam 这款 Ab192623，品名是 Anti-AKT1 (pS473) + AKT2 (pS474) + AKT3 (pS472) antibody [EPR18853]，Rabbit / IgG 来源，属单克隆抗体，验证应用覆盖 WB、IF/ICC、IP、Dot。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

到底怎么选？

裂解液里磷酸酶抑制剂必须加，现配现用，样品全程冰上操作。阳性对照用 EGF 或胰岛素刺激几分钟再收细胞，未刺激的做阴性对照，一张膜就能判读抗体好不好用。认准 Ser473 位点标注，别和 Thr308 的产品混。做 IHC 或 IF 要挑厂家明确验证过磷酸化位点特异性的克隆，普通总蛋白抗体顶替不了。

相关产品列表

品牌	货号	品名	抗原名称
Abcam	Ab81283	Anti-AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]	AKT1 phospho S473
Abcam	Ab192623	Anti-AKT1 (pS473) + AKT2 (pS474) + AKT3 (pS472) antibody [EPR18853]	AKT1 phospho S473