CD274 抗体横评:IHC、流式、WB 怎么分工(人源样品)
做肿瘤免疫的同学,PD-L1 这个指标躲不掉。IHC 要跟诊断级判读对齐,流式要看活细胞表面,WB 又常常只有一团糖基化拖影——同一个靶点,三种应用对抗体的要求完全不是一回事。
CD274 编码的 PD-L1(又叫 B7-H1)是 PD-1 的配体,结合后给 T 细胞递抑制信号,是免疫逃逸的经典机制。肿瘤细胞和部分免疫细胞上都有表达,也是免疫检查点治疗研究里最常看的标志物之一。表达水平的判读方式不同,抗体选型就得跟着变。
这一组产品针对的抗原是 CD274,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab205921(Anti-PD-L1 antibody [28-8]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、MIHC。
Abcam 这款 Ab213524,品名是 Anti-PD-L1 antibody [EPR19759],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
到底怎么选?
IHC 选对石蜡切片验证过的克隆,不同克隆表位不一样,别默认通用。流式检测表面表达用未固定活细胞,选识别胞外段的抗体。WB 上它是个高度糖基化的膜蛋白,条带常在 40-50 kDa 呈弥散状,别指望刀切一样的单带。核对反应种属,人源和小鼠样品用的往往不是同一款。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab205921 | Anti-PD-L1 antibody [28-8] | CD274 |
| Abcam | Ab213524 | Anti-PD-L1 antibody [EPR19759] | CD274 |