针对上述难题,韩晓军教授团队在人造细胞内实现了核苷酸从头合成代谢通路的构建,并将合成的核苷酸用于RNA转录。该代谢通路以NH4HCO3为起点合成尿苷三磷酸(UTP),包括氨甲酰磷酸合成酶(CPS)、天冬氨酸转氨甲酰基酶(ATC)、二氢乳清酶(DHO)、二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)、磷酸核糖焦磷酸激酶(RPPK)、尿苷5′-单磷酸合成酶(UMPs)、尿苷酸激酶(UK)和核苷二磷酸激酶(NDK)8种酶。同时引入由肌酸激酶(CK)和磷酸肌酸组成的ATP再生系统以驱动该代谢途径。在优化的条件下,180分钟内可产生0.85毫摩尔每升的UTP,与CTP、GTP、ATP和T7 RNA聚合酶共同实现了人造细胞内的RNA转录。人造细胞内UTP从头合成代谢通路及其后续RNA转录的成功实现为自主人造细胞的构建奠定了坚实基础。
(哈尔滨工业大学供图)
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