ELISA原理一讲就懂!磁铁找铁钉+七步法
ELISA 到底怎么工作?一个比喻讲明白:磁铁找铁钉抗体是磁铁,抗原是铁钉,酶是报警器。磁铁抓住铁钉后装上报警器,加底物就会「响」(变色),颜色越深=铁钉越多!本质就两条:①抗原-抗体特异性结合(像钥匙开锁一样准)②酶催化显色(OD 值定量,颜色深浅和含量成正比)最常用的夹心法七步,连环画走一遍1️⃣ 包被:捕获
炎症因子要不要做WB?7页讲透取舍逻辑
炎症因子有必要做 WB 吗?qPCR 和 ELISA 够吗?这可能是投稿前最纠结的问题——看完这篇不再犹豫先分清三个层次:qPCR 看 mRNA(转录水平)、ELISA 看分泌型成熟蛋白(最贴合炎症功能)、WB 看总蛋白(前体+成熟)✅ 只用 qPCR+ELISA 就够的场景(最常见):TNF-α、IL-6、IL-1β 等分泌型因子,上清/血
ELISA/WB/IF/IHC对比表!做完实验才不踩坑
新生必存!四大蛋白检测方法一次分清ELISA:定量王者,pg/mL 级灵敏度,但只能测可溶性分泌蛋白、无法定位WB:看分子量和亚型,验证蛋白表达,半定量、步骤多耗时长IF/ICC:荧光定位蛋白在细胞里的位置(膜/核/质),直观但易淬灭IHC:组织原位定位,保留形态信息,临床病理研究主力,半定量主观性强一张表从检测原理、目标
ELISA样本处理SOP!9种样本离心参数全齐了
ELISA 做不好,一半问题出在样本处理上!这份 9 种样本的处理规程直接抄作业血清:无抗凝管,室温静置 1h,1000×g 离心 20min血浆:含抗凝剂采血管,30min 内处理,1000×g 离心 15min细胞上清:1000×g 离心 20min 去残渣细胞裂解液:预冷 PBS 漂洗,裂解后 1500×g 离心 10min组织匀浆:预冷 PBS(0
流式 vs ELISA测因子:谁在分泌 vs 分泌了多少
胞内流式和 ELISA 都能测细胞因子,到底选哪个?先说结论:流式(胞内)看的是「谁在分泌」,ELISA 看的是「分泌了多少」,两者相辅相成!胞内流式:体外刺激细胞(PMA、离子霉素等),固定破膜后荧光抗体内染色,看某类免疫细胞(如 CD3⁺T)分泌因子的占比,能分亚群但只能半定量。ELISA:双抗体夹心法直接定量上清/血清中
多因子检测怎么选?一张图避坑CBA/Luminex/MSD/Olink
做多因子检测还在纠结选哪个平台?这张选型图帮你一次理清单因子验证老老实实用 ELISA;因子数≤12 选 CBA;样本量大又体积小选 Luminex;低丰度因子(神经、心衰类样本)闭眼入 MSD;只做定性初筛选抗体芯片;追求超高通量上千因子就是 Olink 的主场。核心就看三件事:待测因子数、样本体积、要不要定量。底部还整理了 6