炎症因子要不要做WB？7页讲透取舍逻辑

炎症因子有必要做 WB 吗？qPCR 和 ELISA 够吗？这可能是投稿前最纠结的问题——看完这篇不再犹豫
先分清三个层次：qPCR 看 mRNA（转录水平）、ELISA 看分泌型成熟蛋白（最贴合炎症功能）、WB 看总蛋白（前体+成熟）
✅ 只用 qPCR+ELISA 就够的场景（最常见）：TNF-α、IL-6、IL-1β 等分泌型因子，上清/血清/匀浆样本，基础炎症和动物模型两套数据就能支撑结论
⚠ 但局限要知道：mRNA 和蛋白表达经常不匹配（转录后调控、蛋白储存、分泌释放调控）
❗ 四种情况必须补 WB：① 研究炎症小体——IL-1β 要 caspase-1 切割，WB 才能同时看到 pro-IL-1β / cleaved IL-1β / cleaved caspase-1 ② 看胞内总量（膜结合型 pro-TNFα vs sTNF-α）③ 审稿人要求转录+蛋白双验证 ④ 通路蛋白 p-p65、p-IκBα——这是炎症通路蛋白不是细胞因子，必须 WB！
WB 难点：条带弱、前体/成熟分子量接近要选好抗体。收藏这篇，选题不再纠结