Western Blot全流程一页通!11步+避坑警告
WB 新手直接抄!Western Blot 完整流程 11 步一页通,每步都标了翻车警告⚠1️⃣ 样品准备:冰上裂解(RIPA+蛋白酶抑制剂),12000-14000rpm 4℃离心取上清2️⃣ 蛋白定量:BCA/Bradford 做标准曲线,上样 20-60μg/孔3️⃣ 样品处理:4×上样缓冲液 95℃ 5-10min 变性4️⃣ SDS-PAGE 电泳:80V 浓缩胶 → 120-1
炎症因子要不要做WB?7页讲透取舍逻辑
炎症因子有必要做 WB 吗?qPCR 和 ELISA 够吗?这可能是投稿前最纠结的问题——看完这篇不再犹豫先分清三个层次:qPCR 看 mRNA(转录水平)、ELISA 看分泌型成熟蛋白(最贴合炎症功能)、WB 看总蛋白(前体+成熟)✅ 只用 qPCR+ELISA 就够的场景(最常见):TNF-α、IL-6、IL-1β 等分泌型因子,上清/血
抗体配对避坑合集,5 张图讲透 WB/IHC/IF
【开头钩子】一抗二抗怎么配、封闭液怎么选、转膜条件怎么设、内参按什么挑?5 张图一次理清,新手照做不踩坑【内容概览】✅ 种属配对表:小鼠/兔/大鼠/山羊/绵羊/鸡 → 推荐二抗 + 常用标签✅ 显色检测:ECL vs 荧光 vs 酶底物显色,适用场景一表分清✅ 封闭液:别再无脑脱脂奶,磷酸化实验必须换 BSA✅ WB 转膜:湿
抗体怎么选?到底谁抗谁啊
【开头钩子】买抗体只看品牌和靶蛋白名称?难怪 WB 条带总是不对劲。下单前这 8 条逐条过一遍,能帮你省下不少冤枉钱。【内容概览】① 先看 Applications:厂家验证过哪些应用(WB / IF / ICC / IHC / IP / ChIP / FC),WB 认线性表位、IF/IP 认构象表位,WB 好用的抗体 IP 未必拉得下来② Species Reactivity:区分 Val
ELISA/WB/IF/IHC对比表!做完实验才不踩坑
新生必存!四大蛋白检测方法一次分清ELISA:定量王者,pg/mL 级灵敏度,但只能测可溶性分泌蛋白、无法定位WB:看分子量和亚型,验证蛋白表达,半定量、步骤多耗时长IF/ICC:荧光定位蛋白在细胞里的位置(膜/核/质),直观但易淬灭IHC:组织原位定位,保留形态信息,临床病理研究主力,半定量主观性强一张表从检测原理、目标