HA 标签检测:单抗、多抗、ChIP 级怎么挑
做蛋白互作、定位、纯化的同学,HA 标签用得非常多。抗体量大、产品多,可坑也不少:有的抗体 WB 好用但 IP 不行,有的专门验证过 ChIP,有的单抗识别特定表位背景更干净。买错用途,等于白买。
HA 标签源自流感病毒血凝素蛋白的一小段多肽(YPYDVPDYA),分子量小、免疫原性好,是最常用的蛋白标签之一。抗体识别这段序列,不受融合蛋白本身影响,所以用途广泛:WB、IF、IP、ChIP、流式都能做。表位小也意味着固定条件可能影响识别。
这一组产品针对的抗原是 HA tag,反应种属:标签蛋白(无特定反应种属限制)。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab9110(Anti-HA tag antibody - ChIP Grade),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。
proteintech 这款 51064-2-AP,品名是 HA tag Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。
再看 Abcam 的 Ab18181:Anti-HA tag antibody [HA.C5],Mouse / IgG3 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
proteintech 的 66006-2-Ig 值得单独说说——HA Tag Monoclonal antibody,Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。
接下来是 Abcam 的 Ab1424(Anti-HA tag antibody [12CA5]),Mouse / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC、IP、ChIP。
到底怎么选?
WB 常规检测选性价比高的;IP 要选验证过天然复合物的;ChIP 实验选 ChIP Grade 产品。单抗背景通常更干净,多抗信号强。标签位置(N 端还是 C 端)偶尔会影响识别,做过构建后先小量验证。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab9110 | Anti-HA tag antibody - ChIP Grade | HA tag |
| proteintech | 51064-2-AP | HA tag Polyclonal antibody | HA tag |
| Abcam | Ab18181 | Anti-HA tag antibody [HA.C5] | HA tag |
| proteintech | 66006-2-Ig | HA Tag Monoclonal antibody | HA tag |
| Abcam | Ab1424 | Anti-HA tag antibody [12CA5] | HA tag |