HA 标签检测:单抗、多抗、ChIP 级怎么挑

HA 标签检测:单抗、多抗、ChIP 级怎么挑

做蛋白互作、定位、纯化的同学,HA 标签用得非常多。抗体量大、产品多,可坑也不少:有的抗体 WB 好用但 IP 不行,有的专门验证过 ChIP,有的单抗识别特定表位背景更干净。买错用途,等于白买。

HA 标签源自流感病毒血凝素蛋白的一小段多肽(YPYDVPDYA),分子量小、免疫原性好,是最常用的蛋白标签之一。抗体识别这段序列,不受融合蛋白本身影响,所以用途广泛:WB、IF、IP、ChIP、流式都能做。表位小也意味着固定条件可能影响识别。

Abcam Ab9110
图:Abcam Ab9110 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab9110
图:Abcam Ab9110 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
proteintech 51064-2-AP
图:proteintech 51064-2-AP 应用验证图|图源:proteintech 官方产品页
proteintech 51064-2-AP
图:proteintech 51064-2-AP 应用验证图|图源:proteintech 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 HA tag,反应种属:标签蛋白(无特定反应种属限制)。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab9110(Anti-HA tag antibody - ChIP Grade),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。

proteintech 这款 51064-2-AP,品名是 HA tag Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。

再看 Abcam 的 Ab18181:Anti-HA tag antibody [HA.C5],Mouse / IgG3 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

proteintech 的 66006-2-Ig 值得单独说说——HA Tag Monoclonal antibody,Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。

接下来是 Abcam 的 Ab1424(Anti-HA tag antibody [12CA5]),Mouse / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC、IP、ChIP。

到底怎么选?

WB 常规检测选性价比高的;IP 要选验证过天然复合物的;ChIP 实验选 ChIP Grade 产品。单抗背景通常更干净,多抗信号强。标签位置(N 端还是 C 端)偶尔会影响识别,做过构建后先小量验证。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab9110 Anti-HA tag antibody - ChIP Grade HA tag
proteintech 51064-2-AP HA tag Polyclonal antibody HA tag
Abcam Ab18181 Anti-HA tag antibody [HA.C5] HA tag
proteintech 66006-2-Ig HA Tag Monoclonal antibody HA tag
Abcam Ab1424 Anti-HA tag antibody [12CA5] HA tag

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