外泌体研究绕不开的 CD63:抗体怎么挑(人源样品)
外泌体这两年的热度不用多说,可一旦动手,第一个头疼的问题往往是标志物抗体。CD63 是四跨膜蛋白家族成员,在外泌体膜上富集,做 WB、免疫荧光、流式都能用。但选错抗体,可能出现 WB 条带杂、免疫荧光背景深、流式信号弱的问题。
CD63 最初是血小板活化相关抗原,后来发现它在外泌体(exosome)膜上高度富集,于是成了外泌体鉴定的“标配”标志物之一。它在晚期内体和多囊泡体膜上也有分布,所以同时是不错的晚期内体标志。蛋白有多个糖基化位点,实际表观分子量会比理论值偏高一些。
这一组产品针对的抗原是 CD63,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab134045(Anti-CD63 antibody [EPR5702] - Late Endosome Marker),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。
Abcam 这款 Ab59479,品名是 Anti-CD63 antibody [TS63] - BSA and Azide free,Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。
再看 proteintech 的 25682-1-AP:CD63 Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IF-P。
Abcam 的 Ab68418 值得单独说说——Anti-CD63 antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。
接下来是 Abcam 的 Ab193349(Anti-CD63 antibody [MX-49.129.5]),Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
Abcam 的 Ab8219(Anti-CD63 antibody [MEM-259]),Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 IHC、FCM、IF/ICC。
Abcam 这款 Ab271286,品名是 Anti-CD63 antibody [KILL150A],Mouse / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。
再看 abclonal 的 A5271:CD63 Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
到底怎么选?
做外泌体 WB,优先选对天然样品(如细胞上清提取物)验证过的产品。免疫荧光看细胞内定位,需要抗体能识别固定后的构象。流式看表面表达,选针对胞外环的克隆会更顺。如果你同时想区分单抗和多抗:单抗克隆间表位不同,多抗覆盖面广但背景控制要下点功夫。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab134045 | Anti-CD63 antibody [EPR5702] - Late Endosome Marker | CD63 |
| Abcam | Ab59479 | Anti-CD63 antibody [TS63] - BSA and Azide free | CD63 |
| proteintech | 25682-1-AP | CD63 Polyclonal antibody | CD63 |
| Abcam | Ab68418 | Anti-CD63 antibody | CD63 |
| Abcam | Ab193349 | Anti-CD63 antibody [MX-49.129.5] | CD63 |
| Abcam | Ab8219 | Anti-CD63 antibody [MEM-259] | CD63 |
| Abcam | Ab271286 | Anti-CD63 antibody [KILL150A] | CD63 |
| abclonal | A5271 | CD63 Rabbit pAb | CD63 |