外泌体研究绕不开的 CD63:抗体怎么挑(人源样品)

外泌体研究绕不开的 CD63:抗体怎么挑(人源样品)

外泌体这两年的热度不用多说,可一旦动手,第一个头疼的问题往往是标志物抗体。CD63 是四跨膜蛋白家族成员,在外泌体膜上富集,做 WB、免疫荧光、流式都能用。但选错抗体,可能出现 WB 条带杂、免疫荧光背景深、流式信号弱的问题。

CD63 最初是血小板活化相关抗原,后来发现它在外泌体(exosome)膜上高度富集,于是成了外泌体鉴定的“标配”标志物之一。它在晚期内体和多囊泡体膜上也有分布,所以同时是不错的晚期内体标志。蛋白有多个糖基化位点,实际表观分子量会比理论值偏高一些。

Abcam Ab134045
图:Abcam Ab134045 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab134045
图:Abcam Ab134045 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab59479
图:Abcam Ab59479 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab59479
图:Abcam Ab59479 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 CD63,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab134045(Anti-CD63 antibody [EPR5702] - Late Endosome Marker),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。

Abcam 这款 Ab59479,品名是 Anti-CD63 antibody [TS63] - BSA and Azide free,Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。

再看 proteintech 的 25682-1-AP:CD63 Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IF-P。

Abcam 的 Ab68418 值得单独说说——Anti-CD63 antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。

接下来是 Abcam 的 Ab193349(Anti-CD63 antibody [MX-49.129.5]),Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

Abcam 的 Ab8219(Anti-CD63 antibody [MEM-259]),Mouse / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 IHC、FCM、IF/ICC。

Abcam 这款 Ab271286,品名是 Anti-CD63 antibody [KILL150A],Mouse / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC。

再看 abclonal 的 A5271:CD63 Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。

到底怎么选?

做外泌体 WB,优先选对天然样品(如细胞上清提取物)验证过的产品。免疫荧光看细胞内定位,需要抗体能识别固定后的构象。流式看表面表达,选针对胞外环的克隆会更顺。如果你同时想区分单抗和多抗:单抗克隆间表位不同,多抗覆盖面广但背景控制要下点功夫。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab134045 Anti-CD63 antibody [EPR5702] - Late Endosome Marker CD63
Abcam Ab59479 Anti-CD63 antibody [TS63] - BSA and Azide free CD63
proteintech 25682-1-AP CD63 Polyclonal antibody CD63
Abcam Ab68418 Anti-CD63 antibody CD63
Abcam Ab193349 Anti-CD63 antibody [MX-49.129.5] CD63
Abcam Ab8219 Anti-CD63 antibody [MEM-259] CD63
Abcam Ab271286 Anti-CD63 antibody [KILL150A] CD63
abclonal A5271 CD63 Rabbit pAb CD63

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