CD8a 抗体横评:荧光素选择是门学问(小鼠样品)

CD8a 抗体横评:荧光素选择是门学问(小鼠样品)

CD8a 是细胞毒性 T 细胞的看板标志,免疫分型、肿瘤免疫、感染免疫都少不了它。BD 的小鼠 CD8a 产品从纯化到各种荧光偶联都有,选择余地大,但荧光素搭配不当会导致弱信号被淹没,或者补偿失控。

CD8a 与 CD8b 组成异源二聚体,作为 T 细胞受体的共受体结合 MHC I 类分子。在小鼠里,CD8a 也表达于部分树突状细胞亚群,所以表型分析时要结合其他标志一起看。常用克隆如 53-6.7。

Abcam Ab217344
图:Abcam Ab217344 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab217344
图:Abcam Ab217344 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab209775
图:Abcam Ab209775 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab209775
图:Abcam Ab209775 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 CD8A,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab217344(Anti-CD8 alpha antibody [EPR21769]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

Abcam 这款 Ab209775,品名是 Anti-CD8 alpha antibody [EPR20305],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

再看 BD Pharmingen 的 553035:BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD8a,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC,验证应用覆盖 FCM。

BD Pharmingen 的 551162 值得单独说说——BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD8a,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PerCP-Cy5.5,验证应用覆盖 FCM。

接下来是 BD Pharmingen 的 563786(BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD8a),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 BUV395,验证应用覆盖 FCM。

Abcam 的 Ab22378(Anti-CD8 alpha antibody [YTS169.4]),Rat / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 FCM。

到底怎么选?

和 CD4 一样,荧光素亮度要和抗原表达量匹配。多色面板优先把低表达抗原放在亮通道。BUV395 这类新染料需要紫外激光,选之前先核对仪器配置。直接偶联抗体省去二抗,批次间更一致。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab217344 Anti-CD8 alpha antibody [EPR21769] CD8A
Abcam Ab209775 Anti-CD8 alpha antibody [EPR20305] CD8A
BD Pharmingen 553035 BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD8a CD8A
BD Pharmingen 551162 BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD8a CD8A
BD Pharmingen 563786 BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD8a CD8A
Abcam Ab22378 Anti-CD8 alpha antibody [YTS169.4] CD8A

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