CD8a 抗体横评:荧光素选择是门学问(小鼠样品)
CD8a 是细胞毒性 T 细胞的看板标志,免疫分型、肿瘤免疫、感染免疫都少不了它。BD 的小鼠 CD8a 产品从纯化到各种荧光偶联都有,选择余地大,但荧光素搭配不当会导致弱信号被淹没,或者补偿失控。
CD8a 与 CD8b 组成异源二聚体,作为 T 细胞受体的共受体结合 MHC I 类分子。在小鼠里,CD8a 也表达于部分树突状细胞亚群,所以表型分析时要结合其他标志一起看。常用克隆如 53-6.7。
这一组产品针对的抗原是 CD8A,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab217344(Anti-CD8 alpha antibody [EPR21769]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
Abcam 这款 Ab209775,品名是 Anti-CD8 alpha antibody [EPR20305],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
再看 BD Pharmingen 的 553035:BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD8a,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 的 551162 值得单独说说——BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD8a,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PerCP-Cy5.5,验证应用覆盖 FCM。
接下来是 BD Pharmingen 的 563786(BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD8a),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 BUV395,验证应用覆盖 FCM。
Abcam 的 Ab22378(Anti-CD8 alpha antibody [YTS169.4]),Rat / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
和 CD4 一样,荧光素亮度要和抗原表达量匹配。多色面板优先把低表达抗原放在亮通道。BUV395 这类新染料需要紫外激光,选之前先核对仪器配置。直接偶联抗体省去二抗,批次间更一致。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab217344 | Anti-CD8 alpha antibody [EPR21769] | CD8A |
| Abcam | Ab209775 | Anti-CD8 alpha antibody [EPR20305] | CD8A |
| BD Pharmingen | 553035 | BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD8a | CD8A |
| BD Pharmingen | 551162 | BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD8a | CD8A |
| BD Pharmingen | 563786 | BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD8a | CD8A |
| Abcam | Ab22378 | Anti-CD8 alpha antibody [YTS169.4] | CD8A |