IgG1 亚型二抗怎么挑:特异性是关键(小鼠样品)
多色流式或者亚类特异性检测里,买二抗只看“抗小鼠 IgG”是不够的——亚型不对,整条链路就是空的。IgG1 是单抗最常见的亚型,可人源和小鼠源 IgG1 的恒定区结构不一样,二抗不能互换着用。
IgG1 二抗识别的是 IgG 重链的 γ1 恒定区(Cγ1)。小鼠 IgG1 和人 IgG1 的同源性有限,抗小鼠 IgG1 与抗人 IgG1 是两个产品,交叉验证数据都要看清楚。做亚类分型、二抗桥接、IP 后检测,都靠这类抗体。
这一组产品针对的抗原是 IGHG1,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab150113(Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 488)),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
Abcam 这款 Ab6789,品名是 Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/10000。
再看 Abcam 的 Ab205719:Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/20000。
Abcam 的 Ab6728 值得单独说说——Rabbit Anti-Mouse IgG H&L (HRP),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/10000-1/30000。
接下来是 Abcam 的 Ab150115(Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 647)),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/4000。
Abcam 的 Ab150116(Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 594)),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF594,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
Abcam 这款 Ab150117,品名是 Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 488) preadsorbed,Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
再看 Abcam 的 Ab150105:Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 488),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
Abcam 的 Ab97023 值得单独说说——Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/20000。
接下来是 Abcam 的 Ab46540(Rabbit Anti-Mouse IgG H&L),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/10000。
Abcam 的 Ab97040(Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP) preadsorbed),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/5000-1/50000。
Abcam 这款 Ab150114,品名是 Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 555),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF555,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/2000。
再看 Abcam 的 Ab97046:Rabbit Anti-Mouse IgG H&L (HRP),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/20000。
Abcam 的 Ab150107 值得单独说说——Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 647),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/4000。
接下来是 Abcam 的 Ab175473(Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 568)),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF568,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
Abcam 的 Ab150108(Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 594)),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF594,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
Abcam 这款 Ab97240,品名是 Goat Anti-Mouse IgG1 (HRP),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/20000。
再看 Abcam 的 Ab131368:Anti-mouse IgG for IP (HRP),Rat / IgG 来源,属单克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、ELISA、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。
Abcam 的 Ab150120 值得单独说说——Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 594) preadsorbed,Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF594,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
接下来是 Abcam 的 Ab150109(Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 488) preadsorbed),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
Abcam 的 Ab6708(Goat Anti-Mouse IgG H&L),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/3000-1/15000。
Abcam 这款 Ab150118,品名是 Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 555) preadsorbed,Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF555,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
再看 Abcam 的 Ab150119:Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 647) preadsorbed,Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
Abcam 的 Ab6788 值得单独说说——Goat Anti-Mouse IgG H&L (Biotin),Goat / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 Biotin,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、Dot。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/350000。
接下来是 Abcam 的 Ab150106(Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 555)),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF555,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
Abcam 的 Ab6709(Rabbit Anti-Mouse IgG H&L),Rabbit 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/10000。
Abcam 这款 Ab150110,品名是 Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 555) preadsorbed,Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF555,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
再看 Abcam 的 Ab175472:Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 568),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF568,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。
到底怎么选?
先认准检测对象的宿主:小鼠一抗配抗小鼠 IgG1,人源一抗配抗人 IgG1,别按“IgG1”字面通用。WB 还原条件下重链约 50 kDa,轻链在 25 kDa 附近。IP 后检测要选和一抗宿主不冲突的方案,必要时用片段化二抗。偶联形式按平台选,流式看荧光素搭配,WB 看 HRP 或近红外。