圈白细胞看 CD45:流式面板里的必备通道(小鼠样品)
流式圈门第一步是把白细胞从碎渣里拎出来,CD45 就是干这个的。可小鼠 CD45 的剪接变体多,有的克隆认全型,有的偏向 B220,标记错了门内亚群会跟着偏。荧光素选得和别的通道撞车,后面补偿又是一晚上。
CD45(PTPRC)是白细胞共同抗原,一种跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶,几乎所有造血细胞都表达。它有多个剪接变体(如 CD45RA、CD45RO、B220),不同克隆识别的表位不一样。在小鼠里,CD45 是圈白细胞门、排除非造血细胞的标配。
这一组产品针对的抗原是 CD45,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 550539(BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD45),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 IHC、FCM、IF-FRO。
BD Pharmingen 这款 564279,品名是 BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD45,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 BUV395,验证应用覆盖 FCM。
再看 BD Pharmingen 的 559864:BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD45,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 的 550994 值得单独说说——BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD45,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PerCP-Cy5.5,验证应用覆盖 FCM。
接下来是 BD Pharmingen 的 557659(BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Rat Anti-Mouse CD45),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC-Cy7,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 的 553079(BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD45),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 FITC,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 这款 557235,品名是 BD Pharmingen™ PerCP Rat Anti-Mouse CD45,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PerCP,验证应用覆盖 FCM。
再看 BD Pharmingen 的 553080:BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD45,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 FITC,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
圈总白细胞选全型识别的克隆,别用亚型特异的克隆干这个活。荧光素按面板搭配,表达量高的标志可以用 FITC、PerCP 这类常规通道,把强通道留给弱表达的。组织消化样品注意酶处理可能影响表位,挑耐受性好的克隆。上全色面板前先用单染管定补偿和电压。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 550539 | BD Pharmingen™ Purified Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 564279 | BD Horizon™ BUV395 Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 559864 | BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 550994 | BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 557659 | BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 553079 | BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 557235 | BD Pharmingen™ PerCP Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |
| BD Pharmingen | 553080 | BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD45 | CD45 |