线粒体标志 COX IV:WB 定量怎么选抗体(人源/小鼠样品)
做线粒体功能、代谢重编程、线粒体自噬的同学,COX IV 是 WB 里最常用的线粒体内参。上样对照、线粒体纯化鉴定都会用到它。不过这个蛋白定位在内膜、疏水性强,裂解不充分的话信号忽高忽低,定量就不可靠了。
COX IV 是细胞色素 C 氧化酶(复合体 IV)的核编码亚基,定位在线粒体内膜,参与电子传递链最后一步。它在各种组织里表达相对稳定,所以被拿来当线粒体含量的 WB 对照,和 VDAC、TOM20 一起做线粒体蛋白定量。WB 约 17 kDa,条带小而清晰。
这一组产品针对的抗原是 COX IV,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab16056(Anti-COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC。
proteintech 这款 11242-1-AP,品名是 COXIV Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。
再看 Abcam 的 Ab202554:Anti-COX IV antibody [EPR9442(ABC)] - Mitochondrial Loading Control,Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、MIHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。
到底怎么选?
WB 是主要用途,选对多种属验证过的产品。裂解液要能充分溶解内膜蛋白,去垢剂不够信号就弱。做线粒体纯化时,COX IV 是内膜纯度标志,可搭配外膜 TOM20、胞质 GAPDH 做分区对照。看线粒体自噬,和 LC3、p62 一起做共定位或 WB 更有说服力。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab16056 | Anti-COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control | COX IV |
| proteintech | 11242-1-AP | COXIV Polyclonal antibody | COX IV |
| Abcam | Ab202554 | Anti-COX IV antibody [EPR9442(ABC)] - Mitochondrial Loading Control | COX IV |