Goat IgG 二抗怎么挑:山羊源一抗的搭档

Goat IgG 二抗怎么挑:山羊源一抗的搭档

双重染色里如果一抗一个是兔源、一个是山羊源,二抗就得成对地配。Goat IgG 二抗看着冷门一点,多色免疫荧光和多重 WB 里却是常备货。配不好通道串色,两个信号叠在一起,图就废了。

Goat IgG 二抗识别山羊源一抗,常和兔源、小鼠源二抗搭配做多色实验。山羊多抗产量大、批次间相对稳定,做二抗宿主很常见。交叉吸附规格很重要,不吸附的二抗容易和别的宿主 IgG 交叉反应,多重实验里尤其明显。

Abcam Ab150129
图:Abcam Ab150129 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab150129
图:Abcam Ab150129 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab6741
图:Abcam Ab6741 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页
Abcam Ab6741
图:Abcam Ab6741 应用验证图|图源:Abcam 官方产品页

这一组产品针对的抗原是 Goat IgG,反应种属:Goat。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点,挨个说

Abcam 的 Ab150129(Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 488)),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF488,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000-1/4000。

Abcam 这款 Ab6741,品名是 Rabbit Anti-Goat IgG H&L (HRP),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、ELISA。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/5000-1/20000。

再看 Abcam 的 Ab150131:Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 647),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。

Abcam 的 Ab6885 值得单独说说——Donkey Anti-Goat IgG H&L (HRP),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、Dot。

接下来是 Abcam 的 Ab150132(Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 594)),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF594,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。

Abcam 的 Ab97110(Donkey Anti-Goat IgG H&L (HRP)),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/30000。

Abcam 这款 Ab150135,品名是 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 647) preadsorbed,Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/2000。

再看 Abcam 的 Ab150130:Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 555),Donkey / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 AF555,验证应用覆盖 IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/200-1/1000。

到底怎么选?

双重以上染色,先列清楚每个一抗的宿主再反推二抗组合,宿主之间不能重复。挑交叉吸附标记清楚的产品,对人、小鼠、大鼠 IgG 的交叉反应越低越好。WB 和 IF 的二抗别混用,偶联物和封闭体系不通用。荧光素按通道规划选,别都挤在同一个激发区间。

相关产品列表

品牌 货号 品名 抗原名称
Abcam Ab150129 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 488) Goat IgG
Abcam Ab6741 Rabbit Anti-Goat IgG H&L (HRP) Goat IgG
Abcam Ab150131 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 647) Goat IgG
Abcam Ab6885 Donkey Anti-Goat IgG H&L (HRP) Goat IgG
Abcam Ab150132 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 594) Goat IgG
Abcam Ab97110 Donkey Anti-Goat IgG H&L (HRP) Goat IgG
Abcam Ab150135 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 647) preadsorbed Goat IgG
Abcam Ab150130 Donkey Anti-Goat IgG H&L (Alexa Fluor® 555) Goat IgG

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