V5 Tag 抗体横评:转染验证的另一把钥匙
载体上挂了 V5 标签,转染完总要验一下表达。可 V5 表位短,位置放在 N 端还是 C 端、折叠有没有把它埋住,都影响抗体能不能摸到。信号忽有忽无的时候,先别急着怀疑转染效率。
V5 来自副黏病毒的 P/V 蛋白,是一段 14 个氨基酸的小表位,和 FLAG、Myc 一样广泛用于融合蛋白标签。抗 V5 抗体能做 WB、IP、免疫荧光,很多载体把它和纯化标签串在一起用。双标签策略里它经常当第二读出。
这一组产品针对的抗原是 V5 Tag,反应种属:标签蛋白(无特定反应种属限制)。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab27671(Anti-V5 tag antibody [SV5-Pk1]),Mouse / IgG2a 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/5000。
Abcam 这款 Ab9116,品名是 Anti-V5 tag antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IP。
再看 Abcam 的 Ab15828:Anti-V5 tag antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ChIP。
到底怎么选?
WB 用识别变性样品的抗体,转染 24 到 48 小时收样信号最直观。IP 或活细胞染色,挑厂家标注对应验证等级的克隆。表位标签小,设计构建时给它留点柔性连接序列更保险。和 FLAG、Myc 同时用时,把各支抗体的宿主种属错开,二抗才不会串。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab27671 | Anti-V5 tag antibody [SV5-Pk1] | V5 Tag |
| Abcam | Ab9116 | Anti-V5 tag antibody | V5 Tag |
| Abcam | Ab15828 | Anti-V5 tag antibody | V5 Tag |