小鼠嗜酸性粒细胞圈门:Siglec-F 抗体怎么挑
跑小鼠哮喘模型的流式,嗜酸性粒细胞的门经常画得人纠结。SSC 高的那群细胞和中性粒细胞挤在一起,靠自发荧光也分不干净。Siglec-F 是圈嗜酸性粒细胞的常用标志,抗体荧光素选弱了,阳性群和阴性群糊成一片,后面的统计全废。
Siglec-F 是小鼠的唾液酸结合凝集素,主要挂在嗜酸性粒细胞表面,也见于部分肺泡巨噬细胞。它和人的 Siglec-8 是对应分子,所以在小鼠过敏、哮喘、寄生虫感染模型里被拿来当嗜酸性粒细胞的门控标志。分子本身参与细胞黏附和信号调节,不只是个门牌号。
这一组产品针对的抗原是 Siglec-F,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 552126(BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Mouse Siglec-F),Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PE,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 这款 562757,品名是 BD Horizon™ PE-CF594 Rat Anti-Mouse Siglec-F,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PE-CF594,验证应用覆盖 FCM。
再看 BD Pharmingen 的 562680:BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 647 Rat Anti-Mouse Siglec-F,Rat LOU 来源,属单克隆抗体,标记形式为 AF647,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
流式优先选直接偶联荧光素的版本,省掉二抗也减少非特异。PE 或 APC 这类亮的素适合表达不太高的样本,和自发荧光高的肺泡细胞搭配时更稳。注意这只识别小鼠,人的对应标志是 Siglec-8,别买混。上机前先做 Fc 受体阻断,嗜酸性粒细胞和巨噬细胞都容易非特异抓抗体。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 552126 | BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Mouse Siglec-F | Siglec-F |
| BD Pharmingen | 562757 | BD Horizon™ PE-CF594 Rat Anti-Mouse Siglec-F | Siglec-F |
| BD Pharmingen | 562680 | BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 647 Rat Anti-Mouse Siglec-F | Siglec-F |