CD3 抗体怎么选:流式面板的 T 细胞锚点(人源样品)
多色流式拼面板,CD3 一般是第一个定下来的通道。可真到下单时就分叉了:克隆之间差别不小,有的适合分型,有的带激动活性会把细胞提前激活,固定后才能用的又是一类。克隆挑错,面板里最基础的 T 细胞门都会歪。
CD3 是 T 细胞受体复合物的信号组件,和 TCR 非共价结合,几乎只在 T 细胞上表达,所以是圈 T 细胞的公认标志。它由几个亚基组成,流式常用的克隆大多识别 ε 链(CD3e),不同克隆的表位和功能影响差别不小。做免疫分型、CAR-T 质控、肿瘤浸润淋巴细胞研究都绕不开它。
这一组产品针对的抗原是 CD3,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 560835(BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD3),Mouse BALB/c IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 PerCP-Cy5.5,验证应用覆盖 FCM。
BD Pharmingen 这款 557943,品名是 BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Mouse Anti-Human CD3,Mouse BALB/c IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 AF700,验证应用覆盖 FCM。
再看 BD Pharmingen 的 563546:BD Horizon™ BUV395 Mouse Anti-Human CD3,Mouse BALB/c IgG1 来源,属单克隆抗体,标记形式为 BUV395,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
分型实验选不带激动活性的克隆,免得上机前把细胞先刺激了一轮。荧光素按面板亮度分配:CD3 表达高,可以放在相对暗的通道,把亮的素留给低表达标志。人源实验注意克隆是否验证过流式和对应种属。需要活化实验再考虑刺激型克隆,两者别混用。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 560835 | BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD3 | CD3 |
| BD Pharmingen | 557943 | BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Mouse Anti-Human CD3 | CD3 |
| BD Pharmingen | 563546 | BD Horizon™ BUV395 Mouse Anti-Human CD3 | CD3 |