查 p53 积累,IHC 和 WB 的思路不一样(人源样品)
免疫组化染 p53,最常见的困惑是:明明对照正常组织几乎不着色,肿瘤细胞核却黑成一团,这算阳性还是假象?p53 在突变后容易在核内积累,染色变强有时恰恰提示突变,读片逻辑和一般标志物反过来。抗体选得不对,这种差别根本出不来。
p53 是 TP53 基因编码的转录因子,平时在细胞里维持低水平,DNA 损伤时短暂升高,决定细胞是修复还是凋亡。它在超过一半的人类肿瘤里发生突变,突变蛋白半衰期变长,所以在 IHC 上表现为核内强阳性积累。野生型和突变型的检测需求不同,这直接影响抗体怎么挑。
这一组产品针对的抗原是 p53,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab1101(Anti-p53 antibody [DO-1]),Mouse / IgG2a 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
Abcam 这款 Ab32389,品名是 Anti-p53 antibody [E26],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。
再看 Abcam 的 Ab32049:Anti-p53 antibody [Y5],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500-1/5000。
到底怎么选?
做 IHC 查积累,选对石蜡切片验证过的克隆,核染信号要干净。做 WB 看总 p53 和药物处理后的诱导变化,抗体要能识别约 53 kDa 的条带,样品别反复冻融。磷酸化位点抗体是另一类产品,想看激活状态要认准位点。人源样品为主,买之前核对反应种属表。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab1101 | Anti-p53 antibody [DO-1] | p53 |
| Abcam | Ab32389 | Anti-p53 antibody [E26] | p53 |
| Abcam | Ab32049 | Anti-p53 antibody [Y5] | p53 |